Okruhy znalostí ke státní závěrečné zkoušce: Obecné principy chromatografie - Definice, význam a rozdělení separačních metod (metody využívající fázových rovnovah, separace v silových polích), podstata a princip chromatografie, historický vývoj. - Termodynamický aspekt separace - popis distribuce složek mezi mobilní a stacionární fází (distribuční konstanta, retenční faktor, retenční časy a objemy, redukované veličiny, retenční indexy). - Kinetický aspekt separace - účinnost separace a vliv pracovních podmínek na účinnost, představa teoretického patra, dynamická van Deemterova teorie. - Hodnocení kvality separace - rozlišení, příspěvky, které se na něm podílejí. - Metody kvalitativní a kvantitativní chromatografické analýzy - vlastnosti detekce (šum a drift signálu, citlivost, linearita, meze detekce a stanovení), zpracování signálu, postupy při kvantifikaci metodou vnitřní normalizace, vnitřního a vnějšího standardu, přídavku standardu a kalibrační křivky. Plynová chromatografie - Princip plynové chromatografie, základní prvky plynového chromatografu, způsoby zavádění vzorků. - Detektory v plynové chromatografii (tepelně vodivostní, ionizační detektory, spojení s hmotnostní spektrometrií). - Typy kolon používané v plynové chromatografii, nosiče stacionární fáze, zakotvené a chemicky vázané stacionární fáze. Izotermické separace a práce s programovanou teplotou. - Hlavní oblasti využití plynové chromatografie. Kapalinová chromatografie - Charakteristika vysokoúčinné kapalinové chromatografie, instrumentace, izokratická a gradientová eluce v HPLC. - Kolony pro kapalinovou chromatografii - klasifikace kolon, rozměry, plnění. Stacionární fáze v HPLC - typy náplní (porézní, povrchově-porézní, monolitické), velikosti částic a jejich vliv na separaci. - Základní rozdělení technik HPLC na základě interakcí ve stacionární a mobilní fázi, principy separace v systému s normálními a obrácenými fázemi, chromatografie hydrofilních interakcí, chromatografie iontové výměny, iontových párů a chromatografie sterické výluky. - Hlavní oblasti využití kapalinové chromatografie. Elektromigrační separační techniky - Princip a rozdělení elektromigračních separačních metod, instrumentální uspořádání. - Základní veličiny (pohyblivost efektivní, zdánlivá), vyhodnocování elektroforegramů. - Kapilární izotachoforéza a další elektroforetické módy (micelární elektrokinetická chromatografie, izoelektrická fokusace, gelová elektroforéza, elektrochromatografie). - Hlavní oblasti aplikace elektromigračních separačních technik.
|