|
Vyučující
|
-
Špryncová Martina, Ing. Bc. Ph.D.
-
Štěpánková Šárka, Mgr. Ph.D.
|
|
Obsah předmětu
|
Bezpečnost práce v biochemické laboratoři, teoretický úvod - spektrofotometrie (absorbance, transmitance, absorpční maximum). Techniky pipetování pístovými mikropipetami, ověření přesnosti práce, určení absorpčního maxima, kalibrace, metoda jednoho standardu. Příprava pufrů, výpočet pH, měření pH, závislost pufrovací kapacity na koncentraci pufru, vliv iontové síly na pH pufru. Aminokyseliny a bílkoviny - ninhydrinová reakce, xantoproteinová reakce, stanovení koncentrace vybrané aminokyselin ninhydrinovou reakcí. Aminokyseliny a bílkoviny - biuretová reakce, stanovení koncentrace albuminu biuretovou reakcí. Stanovení koncentrace proteinů BCA metodou nebo metodou podle Bradfordové, stanovení koncentrace a čistoty proteinů měřením absorbance v UV oblasti. Srážení proteinů - reverzibilní srážení proteinů, srážení proteinů spojené s denaturací, stanovení účinnosti vybraných deproteinačních činidel. Stanovení izoelektrického bodu vybraných bílkovin. Kvalitativní stanovení sacharidů (důkazové reakce). Kvantitativní stanovení glukosy (enzymaticky - glukosaoxidasa). Vitamíny - kvalitativní stanovení vitamínů A, D, semikvantitativní stanovení vitamínu C. Nukleové kyseliny - rozlišení DNA a RNA, stanovení DNA a RNA, měření absorbance v UV oblasti. Zápočtový test.
|
|
Studijní aktivity a metody výuky
|
|
Laborování
|
|
Výstupy z učení
|
Cílem předmětu je vytvořit u studenta praktickou experimentální zručnost při provádění biochemických analýz, měření a stanovení jednotlivých fyzikálních a chemických veličin substrátů, enzymů, hormonů, vitaminů, nukleových kyselin.
Posluchač je po absolvování předmětu schopen provádět experimentální laboratorní práci v oboru biochemie s použitím běžných přístrojů, např. centrifugaci, extrakci, deproteinaci, spektrofotometrická měření. Výsledky měření je schopen statisticky zpracovat.
|
|
Předpoklady
|
nespecifikováno
|
|
Hodnoticí metody a kritéria
|
Písemná zkouška
Povinná účast na laboratorních cvičeních. Zápočtový test.
|
|
Doporučená literatura
|
-
studijní materiály na IS STAG.
-
Štěpánková Š., Královcová P., Kanďár R. Laboratorní cvičení z obecné a klinické biochemie. ISBN 978-80-7395-958-6.
-
Štěpánková Š., Žáková P., Kanďár R. Laboratorní cvičení z obecné a klinické biochemie (třetí doplněné vydání). Pardubice. 2022.
|