Bezpečnost a zásady práce v mikrobiologické laboratoři, vybavení mikrobiologické laboratoře, způsoby sterilizace, dezinfekce, příprava skla, zásady aseptické práce, základní terminologie. Živné půdy (tekuté a tuhé) - příprava, sterilizace a rozlévání živných půd - příprava agarových ploten, příprava šikmého agaru, příprava zkumavky s tekutým kultivačním médiem. Očkování mikroorganismů, nácvik očkování různými technikami, izolace čisté kultury, uchovávání a oživování bakteriálních kultur (izolace čárkováním na připravené agarové plotny, očkování na šikmý agar a do tekutého kultivačního média). Růst mikroorganismů na pevných a v tekutých živných půdách - půdy základní, selektivní, selektivně diagnostické (popis růstu mikroorganismů v tekutých a tuhých půdách). Aerobní, mikroaerofilní a anaerobní inkubace (praktické ukázky jednotlivých způsobů inkubací). Vliv vnějších podmínek na růst mikroorganismů - pH, teplota, UV záření, osmotický tlak (stanovení smrtící doby, stanovení optimální expoziční doby germicidního zářiče, stanovení minimální inhibiční koncentrace dezinfekčního prostředku). Mikroskopické vyšetřovací metody - pozorování živých mikroorganismů v nativním preparátu a v zástinu. Barvení pouzder (metoda dle Burriho). Barvení dle Grama, morfologie bakteriálních buněk, uspořádání v zorném poli. Barvení podle Giemsy. KOH test. Acidorezistentní barvení - metoda Ziehl-Neelsena. Barvení spor dle Wirtze-Conklina. Identifikace mikroorganismů pomocí biochemických testů - biochemické testy založené na přeměnách sacharidů - oxidace, fermentace, VP a MR test; biochemické testy založené na přeměně dusíkatých látek - důkaz ureázy, dekarboxylace lyzinu, důkaz tvorby indolu, redukce dusičnanů na dusitany; ostatní biochemické testy - přítomnost enzymu katalázy, cytochromoxidázy, produkce sulfanu, asimilace citrátu, test pohyblivosti bakterií. Vyhodnocení biochemických testů a ověření produkce hemolyzinů (rod Staphylococcus, Streptococcus a ostatní hemolytické mikroorganismy). Moderní metody používané pro identifikaci mikroorganismů (rychlé screeningové testy, rychlé metody, molekulárně biologické metody - PCR, MALDI-TOF/MS). Mykologie - přímé pozorování mikroskopických hub v biologickém materiálu, GT-test, produkce chlamydospor a pseudomycelia u kvasinek, histologické preparáty.
|
-
Aktualizované návody ve STAGu. .
-
Koukalová, D. a kol. Praktická cvičení z lékařské mikrobiologie I. 2009.
-
Votava, Miroslav. Kultivační půdy v lékařské mikrobiologii. Brno: Hortus, 2000. ISBN 80-238-5058-X.
-
Votava, Miroslav. Lékařská mikrobiologie obecná. Brno: Neptun, 2005. ISBN 80-86850-00-5.
-
Votava, Miroslav. Lékařská mikrobiologie vyšetřovací metody. Brno: Neptun, 2010. ISBN 978-80-86850-04-7.
-
Vytřasová, Jarmila. Laboratorní cvičení z obecné mikrobiologie. Pardubice: Univerzita Pardubice, 2014. ISBN 978-80-7395-747-6.
|