|
Vyučující
|
-
Kanďár Roman, prof. Mgr. Ph.D.
-
Štěpánková Šárka, Mgr. Ph.D.
|
|
Obsah předmětu
|
Historie poznání enzymů. Stavba enzymů (holoenzym, apoenzym, kofaktor). Mnohočetné formy enzymů (isoenzymy, konjugované enzymy, polymerní enzymy), multienzymy (multienzymové komplexy, polypeptidy). Názvosloví enzymů (triviální, polosystematické, systematické). Klasifikace enzymů. Enzymová aktivita (katalytická, specifická). Používání konvenčních jednotek aktivity. Metody měření aktivity enzymů (optické, elektrochemické). Mechanismus enzymové katalýzy (termodynamika a kinetika přeměny substrátu na produkt). Tvorba komplexu enzym-substrát. Energetický profil nekatalyzované a katalyzované reakce, možnosti ovlivnění aktivační energie. Enzymová kinetika. Vliv reakčních podmínek a efektorů na rychlost enzymatické reakce. Kinetika enzymových reakcí v ustáleném stavu. Kinetika jednosubstrátových reakcí (rovnice Michaelis-Mentenové). Kinetika vícesubstrátových reakcí. Software pro enzymovou kinetiku. Inhibice enzymů. Inhibice substrátem, produktem, inhibitorem. Reverzibilní/ireverzibilní inhibitory. Typy plné inhibice (kompetitivní, nekompetitivní, akompetitivní, smíšená). Kooperativní jevy při působení enzymů. Homotropní a heterotropní kooperativa, allosterie. Izolace enzymů. Živočišné, rostlinné a mikrobiální zdroje enzymů. Uvolňování intracelulárních enzymů z buněk. Výběr separačních technik. Purifikační postupy. Studium struktury enzymů. Krystalizace enzymů. Rentgenová krystalografie. Enzymy v oblasti klinické biochemie. Stanovení klinicky významných enzymů. Stanovení analytů s použitím rozpustných enzymů. Imobilizace enzymů. Aplikace. Enzymové biosenzory. Enzymová imunoanalýza. Enzymové značky a metody přípravy enzymových konjugátů. Enzymy jako markery genové exprese. Enzymové inženýrství. Nejdůležitější enzymy používaná v praxi. Příklady uplatnění (medicína, potravinářství, výroba pracích prostředků, organická syntéza).
|
|
Studijní aktivity a metody výuky
|
|
Monologická (výklad, přednáška, instruktáž)
|
|
Výstupy z učení
|
Cílem předmětu je prohloubit znalosti enzymologie získané v předmětech Obecná biochemie a Klinická biochemie.
|
|
Předpoklady
|
Studenti by měli získat základní představy o vlastnostech enzymů, jejich struktuře, dělení, názvosloví, mechanismu katalytického působení, enzymové kinetice a praktických aplikacích využití enzymů.
|
|
Hodnoticí metody a kritéria
|
Písemná zkouška
|
|
Doporučená literatura
|
-
Elektronické podklady (k dispozici na studijním webu univerzity STAG).
-
Nelson DL, Cox MM. Lehninger Principles of Biochemistry. New York: Freeman WH, 2004.
-
Palmer T, Bonner PL. Enzymes: Biochemistry, Biotechnology and Clinical Chemistry. Woodhead Publishing: Horwood, 2007.
-
Voet, Donald. Biochemie. Praha: Victoria Publishing, 1995. ISBN 80-85605-44-9.
|