Úvod, přehled metod buněčné i humorální imunity v kontextu imunopatol. stavů, seznámení s náplní labor. cvičení, požadavky na studenta. Přehled - základní i specializovaná imunologická vyšetření. Biologický materiál - krev, stolice, BAL, mozkomíšní mok a ejakulát, výpotky, kostní dřeň, indukované sputum, ejakulát a tkáně. Přehled STATIM vyšetření v klinické imunologii. Systém kontroly kvality. Pojmy a zkratky, Národní autorizační středisko pro klinické laboratoře, Společnost pro externí kontrolu kvality. Odběr biologického materiálu. Buněčná imunita a imunofenotypizace - základní a rozšířené vyšetření lymfocytárních subpopulací v periferní krvi, funkční testy lymfocytů, imunofenotypizace buněk krevních malignit. Principy vyšetření buněčné imunity (počty buněk, funkční testy), techniky izolace buněk, imunomagnetická separace buněk. Imunomagnetická izolace B-lymfocytární buněčné populace + identifikace B-lymfocytů metodou přímé imunofluorescence. Interpretace výsledku imunofenotypizačních vyšetření. Průtokové cytometrie a její využití v klinické praxi - základy pojmologie, imunofenotypizace krevních buněk, zjištěni HLA haplotypu, oxidační vzplanutí, detekce mikrobicidie, fagocytózy, test blastické transformace, využití v hematoonkologii. Praktické seznámení s technikou průtokové cytometrie. Imunofenotypizace krevních buněk metodou průtokové cytometrie, analýza a vyhodnocení naměřených dat + praktické příklady výsledků analýz s vazbou na hematoonkologické nebo imunodeficientní onemocnění. Funkční testy lymfocytů - test časné a pozdní aktivace, test blastické transformace lymfocytů, funkční testy polymorfonukleárních granulocytů - fagocytóza kvasinek - ingesce, metabolické vzplanutí granulocytů (Burst test) Vyšetřování fagocytózy, testy ingesce pomocí mikrosférických hydrofilních partikulí. Přehled a principy vyšetření komplementu. Vyšetřování složek komplementu (C3) precipitační metodou s turbidimetrickou detekcí. Vyšetření aktivace komplementu klasickou a alternativní drahou (CH50, AH50). Likvorologie, albuminový quocient qALB, intrathekální protilátky (Ing. Matuchová, atestovaný lab. pracovník) Hematoonkologické malignity. Mnohočetný myelom. ALL, CLL. Vyšetření monoklonálních imunoglobulinů, volných lehkých řetězců, ?2-mikroglobulinu v séru, v moči. Monoklonální gamapatie (MG). Kryoglobulinémie. Hyperviskózní syndrom. Detekce monoklonálních proteinů v séru metodou imunofixace - HYDRAGEL IF Penta K20 kit. Autoimunita - Immunoblottové techniky pro průkaz autoprotilátek. Vyšetření tkáňových autoprotilátek nepřímou imunofluorescencí. Imunoblot pro průkaz antinukleárních protilátek -BLOT-LINE ANA - BLOT v lidském séru. Alergologie - stanovení specifických IgE proti vybraným alergenům metodami ELISA, LEIA, FEIA, EAST, ISAC multiplexová vyšetření. Interpretace výsledků v kontextu imunopatol. stavů (MUDr. T. Sýkora - alergolog specialista). Využití v klin. diagnostice. Personalizovaná terapie, cílená léčba. Příklady kazuistik s návrhem panelu vyšetření a jejich interpretace. Antiinfekční imunita - immunoblot, aglutinační testy, ELISA, imunofluorescence, ELISPOT průkaz infekce M. tuberculosis Quantiferon průkaz infekce M.t., detekce latentní infekce M.t. testem T-spot TB. Příprava autovakcín - autovakcíny a stockvakcíny pro injekční, perorální a nasální použití. Indikace, Kontraindikace, Odběr materiálu: výtěr tonzil, nosu, laryngu, z kůže, oka, pochvy; sputum, punktát, moč. Podávání vakcín. Bakteriální injekční vakcíny, enterovakcíny, autoenterovakcíny, intranasální mikrobiální vakcíny. Výsledky laboratorních vyšetření, Kazuisitky z klinické praxe. Referenční laboratoř. Exkurze do zdravotnického zařízení Medila, s.r.o., Pardubice nebo zařízení Interimun, Pardubice, Toplelex, Praha). Seznámení s procesy: kontrola kvality, typy kontrol, kontrolní materiály a postupy. Řízená dokumentace v praxi. Shrnutí.
|
-
https://www.fnhk.cz/ukia/seznam-metod/laboratorni-prirucka.
-
Bartůňková, Jiřina. Vyšetřovací metody v imunologii. Praha: Grada, 2005. ISBN 80-247-0691-1.
-
Eckschlager, Tomáš. Průtoková cytometrie v klinické praxi. Praha: Grada, 1999. ISBN 80-7169-279-4.
-
Lahoda Brodská, Helena. Laboratorní vyšetření v klinické praxi. Praha: Grada Publishing, 2022. ISBN 978-80-271-3243-0.
-
Litzman J., et al. Základy vyšetření v klinické imunologii. Brno, 2009.
-
Maisnar V., Tichý M. Monoklonální imunoglobuliny - výskyt a možnosti jejich průkazu. Nucleus HK, 2012.
-
Slováková, Marcela. Vybraná laboratorní cvičení z imunoanalytických metod. Pardubice: Univerzita Pardubice, 2013. ISBN 978-80-7395-610-3.
|