|
Vyučující
|
-
Slováková Marcela, doc. Mgr. Ph.D.
-
Královec Karel, RNDr. Ph.D.
-
Matuchová Inka, Ing. Ph.D.
-
Morávek Ondřej, Mgr.
-
Korecká Lucie, doc. RNDr. Ph.D.
|
|
Obsah předmětu
|
1. týden: Přehled imunologických a imunochemických vyšetřovacích metod, kvantifikace složek, funkční testy, vlastnosti antigenu. Sérologické metody aglutinační, precipitační. Úlohy: Průkaz revmatoidního faktoru v séru metodou latexové aglutinace. Průkaz CRP v séru metodou latexové aglutinace. 2. týden: Techniky založené na precipitační reakci, turbidimetrie, nefelometrie, imunodifúzní metody (dvojitá, radiální), přehled stanovovaných analytů. Úlohy: Mikroturbidimetrické stanovení sérových imunoglobulinů v prostředí PEG. Detekce CRP v lidské krvi. 3. týden: Techniky izolace buněk, principy vyšetření buněčné imunity (počty buněk, funkční testy). Úloha: Izolace lymfocytární frakce z krve. 4. týden: Technika průtokové cytometrie. Úloha: Příprava vzorku plné krve pro průtokovou cytometrii a analýza krevních buněk pomocí FSC/SSC histogramu. 5. týden: Funkční testy granulocytů, lymfocytů. Úloha: Sledování fagocytárních schopností leukocytů in vitro s použitím Saccharomyces cerevisiae. 6. týden: Přehled a principy vyšetření komplementu. Úloha: Stanovení CH50 ve vzorku lidského séra. 7. týden: Úloha: Stanovení antinukleárních protilátek metodou ELISA, hodnocení výsledků v klinickém kontextu. Exkurze: Vyšetření tkáňových autoprotilátek nepřímou imunofluorescencí. 8. týden: Imunochromatografické testy. Příklady kazuistik s návrhem panelu vyšetření. 9. týden: Ing. Matuchová,Ph.D.: Imunoblottové techniky pro průkaz autoprotilátek ANA, ENA, dg. myositidy, revmatoidní artritidy, protilátky pANCA a cANCA, antifosfolipidové, orgánově nespecifické, specifické; dg. onemocnění jater, diabetes, neuropatií. Imunoblot pro průkaz ANA protilátek v lidském séru. 10. týden: Průkaz monoklonálních Ig a lehkých řetězců v séru a moči. Příklady detekce v séru metodou imunofixace. 11. týden: Exkurze do zdravotnického zařízení (Interimun, Medila). Procesy kontrola kvality, kontr. materiály a postupy.
|
|
Studijní aktivity a metody výuky
|
|
Nácvik dovedností, Laborování
|
|
Výstupy z učení
|
Cílem předmětu je získání přehledu všech nejdůležitějších metod, které se dnes běžně i nově využívají v oboru lékařské imunologie a imunohematologie. Metody budou probírány komplexně, od jejich principu, pracovních postupů a potřebného vybavení až po vyhodnocování výsledků a kontrolu kvality.
Po absolvování předmětu je student schopen zvolit vhodnou metodu pro klinické imunologické vyšetřování, popsat principy metod a vyhodnotit výsledky.
|
|
Předpoklady
|
Předmět úzce navazuje na teoretickou výuku z imunologie a imunohematologie a na laboratorní dovednosti studenta, které získal v předchozích semestrech v předmětech laboratoří z biochemie, hematologie a molekulárně biologických metod.
|
|
Hodnoticí metody a kritéria
|
Písemná zkouška, Posouzení zadané práce
V předmětu proběhnou laboratorní úlohy na katedře. K laboratorním úlohám jsou nutné teoretické znalosti z imunologie a u některých je plánován seminář s ukázkami a kazuistikami, ve kterých jsou vyučující externisti ze zdravotnictví. Krátký test na začátku úloh (A/N) Písemný zápočet (50%) Laboratorní protokoly (50%)
|
|
Doporučená literatura
|
-
Slováková M. Pracovní návody a materiály ve Stagu.
-
Slováková, Marcela. Vybraná laboratorní cvičení z imunoanalytických metod. Pardubice: Univerzita Pardubice, 2013. ISBN 978-80-7395-610-3.
|