|
Vyučující
|
-
Morávek Ondřej, Mgr.
-
Beránek Martin, prof. PharmDr. Ph.D.
-
Jankovičová Barbora, Mgr. Ph.D.
|
|
Obsah předmětu
|
Výběr genu zájmu v kvasinkové genomové databázi, návrh primerů. Izolace DNA z kvasinek Saccharomyces cerevisiae. Příprava kompetentních buněk Escherichia coli. Amplifikace vybraného genu z kvasinkové DNA pomocí PCR. Kontrola produktů PCR pomocí elektroforézy a jejich čištění. Vložení PCR produktu do vektoru s využitím kitu. Příprava selekčních médií, přeočkování kolonií do tekutého média. Minipreparace plasmidové DNA. Restrikční štěpení výsledného vektoru. Elektroforetická analýza výchozího a výsledného vektoru a restrikčních štěpů. Příprava pomůcek na izolaci RNA. Izolace RNA z krve. Elektroforetická a spektrofotometrická charakterizace získané RNA. Celkové zhodnocení výsledků, včetně ekonomické náročnosti experimentů.
|
|
Studijní aktivity a metody výuky
|
|
Monologická (výklad, přednáška, instruktáž), Laborování
|
|
Výstupy z učení
|
Hlavním cílem předmětu je praktické zvládnutí izolace nukleových kyselin a jejich analýzu, zvládnutí metody PCR a interpretaci dílčích výsledků.
|
|
Předpoklady
|
nespecifikováno
|
|
Hodnoticí metody a kritéria
|
Písemná zkouška, Posouzení zadané práce
|
|
Doporučená literatura
|
-
aktuální návody na jednotlivá cvičení (portál STAG Upa).
-
T. Ruml. Laboratoře z genového inženýrství. Praha: VŠCHT, 1997.
|