Předložená diplomová práce se zabývá problematikou objevení biomarkeru, který by mohl být použit v klinické praxi na pomoc při včasném odhalování jaterní steatózy, či posouzení jejího stavu v důsledku metabolických onemocnění jako je metabolický syndrom nebo diabetes mellitus, které jsou díky dnešnímu životnímu stylu čím dál častější. Vývoj nových testů je důležitý pro včasnou diagnostiku, kdy se zvyšuje pravděpodobnost maximalizace farmakologické intervence a klesá riziko progrese onemocnění. Je diskutována závislost enzymových aktivit a celkového množství mastných kyselin v 5 lipidových frakcích jaterní tkáně na plazmatických aktivitách enzymů ve VLDL-total a VLDL-TG frakci ve vzorcích od 16 pacientů. Po rozdělení lipidů do jednotlivých tříd pomocí tenkovrstvé chromatografie byly plynovou chromatografií stanoveny koncentrace mastných kyselin v jednotlivých frakcích. Z hodnot mastných kyselin se vypočítalo jejich celkové množství a z jednotlivých poměrů byly určeny aktivitní indexy, které se porovnávaly mezi sebou. Byla nalezena asociace mezi plazmatickou ?9- desaturázou a množstvím mastných kyselin v jaterní tkáni a mezi plazmatickou elongázou a množstvím mastných kyselin v jaterní tkáni.
Anotace v angličtině
This thesis deals with the discovery of biomarker that could be used in clinical practice to assist in early detection of liver steatosis, or to assess its condition as a result of metabolic diseases such as metabolic syndrome or diabetes mellitus, which are due to the current lifestyle becoming more frequent. Development of new tests is important for early diagnosis, which increases the probability of maximizing the pharmacological intervention and decreases the risk of disease progression. There is discussed the dependence of enzyme aktivity and total fatty acids in 5 lipid fractions of liver tissue versus plasma enzyme activities in total VLDL-TG and VLDL-fraction in samples from 16 patients. After the separation of lipids into individual classes by thin-layer chromatography were fatty acids determined by gas chromatography in individual lipid fractions. From the values of fatty acids has been calculated their total amount and from particular ratios were determined activity indices and they were compared among themselves. Association has been found between plasmatic ?9- desaturase versus the amount of fatty acids in the liver tissue and also between plasmatic elongace versus the amount of fatty acids in the liver tissue.
Předložená diplomová práce se zabývá problematikou objevení biomarkeru, který by mohl být použit v klinické praxi na pomoc při včasném odhalování jaterní steatózy, či posouzení jejího stavu v důsledku metabolických onemocnění jako je metabolický syndrom nebo diabetes mellitus, které jsou díky dnešnímu životnímu stylu čím dál častější. Vývoj nových testů je důležitý pro včasnou diagnostiku, kdy se zvyšuje pravděpodobnost maximalizace farmakologické intervence a klesá riziko progrese onemocnění. Je diskutována závislost enzymových aktivit a celkového množství mastných kyselin v 5 lipidových frakcích jaterní tkáně na plazmatických aktivitách enzymů ve VLDL-total a VLDL-TG frakci ve vzorcích od 16 pacientů. Po rozdělení lipidů do jednotlivých tříd pomocí tenkovrstvé chromatografie byly plynovou chromatografií stanoveny koncentrace mastných kyselin v jednotlivých frakcích. Z hodnot mastných kyselin se vypočítalo jejich celkové množství a z jednotlivých poměrů byly určeny aktivitní indexy, které se porovnávaly mezi sebou. Byla nalezena asociace mezi plazmatickou ?9- desaturázou a množstvím mastných kyselin v jaterní tkáni a mezi plazmatickou elongázou a množstvím mastných kyselin v jaterní tkáni.
Anotace v angličtině
This thesis deals with the discovery of biomarker that could be used in clinical practice to assist in early detection of liver steatosis, or to assess its condition as a result of metabolic diseases such as metabolic syndrome or diabetes mellitus, which are due to the current lifestyle becoming more frequent. Development of new tests is important for early diagnosis, which increases the probability of maximizing the pharmacological intervention and decreases the risk of disease progression. There is discussed the dependence of enzyme aktivity and total fatty acids in 5 lipid fractions of liver tissue versus plasma enzyme activities in total VLDL-TG and VLDL-fraction in samples from 16 patients. After the separation of lipids into individual classes by thin-layer chromatography were fatty acids determined by gas chromatography in individual lipid fractions. From the values of fatty acids has been calculated their total amount and from particular ratios were determined activity indices and they were compared among themselves. Association has been found between plasmatic ?9- desaturase versus the amount of fatty acids in the liver tissue and also between plasmatic elongace versus the amount of fatty acids in the liver tissue.
1. Vypracujte literární rešerši se zaměřením na metabolizmus lipidů u člověka a popište význam
stanovení lipidů a mastných kyselin pro diagnostické účely.
2. U studovaných osob proveďte rozdělení EDTA plazmy do pěti tříd (fosfolipidy, diacylglyceroly,
mastné kyseliny, triacylglyceroly a estery cholesterolu) pomocí preparativní chromatografie na
tenké vrstvě a stanovte jejich koncentrace.
3. Vypočtěte obsah nasycených a nenasycených mastných kyselin ve všech třídách lipidů VLDL
frakcí a jaterních vzorků z chromatografických záznamů plynové chromatografie.
4. Ze získaných hodnot vypočtěte aktivity \recke{Delta}9-desaturázy, \recke{Delta}6-desaturázy a \recke{Delta}5-desaturázy a vypracujte jejich vzájemné závislosti.
5. Proveďte statistické vyhodnocení výsledků a diskutujte jejich použitelnost pro hodnocení
metabolických změn v organizmu.
Zásady pro vypracování
1. Vypracujte literární rešerši se zaměřením na metabolizmus lipidů u člověka a popište význam
stanovení lipidů a mastných kyselin pro diagnostické účely.
2. U studovaných osob proveďte rozdělení EDTA plazmy do pěti tříd (fosfolipidy, diacylglyceroly,
mastné kyseliny, triacylglyceroly a estery cholesterolu) pomocí preparativní chromatografie na
tenké vrstvě a stanovte jejich koncentrace.
3. Vypočtěte obsah nasycených a nenasycených mastných kyselin ve všech třídách lipidů VLDL
frakcí a jaterních vzorků z chromatografických záznamů plynové chromatografie.
4. Ze získaných hodnot vypočtěte aktivity \recke{Delta}9-desaturázy, \recke{Delta}6-desaturázy a \recke{Delta}5-desaturázy a vypracujte jejich vzájemné závislosti.
5. Proveďte statistické vyhodnocení výsledků a diskutujte jejich použitelnost pro hodnocení
metabolických změn v organizmu.
Seznam doporučené literatury
podle pokynů vedoucího diplomové práce
Seznam doporučené literatury
podle pokynů vedoucího diplomové práce
Přílohy volně vložené
-
Přílohy vázané v práci
-
Převzato z knihovny
Ne
Plný text práce
Přílohy
Posudek(y) oponenta
Hodnocení vedoucího
Záznam průběhu obhajoby
1. Prezentace výsledků diplomové práce.
2. Diskuze k posudkům vedoucího a oponenta diplomové práce.
3. Diplomantka zodpověděla všechny dotazy a připomínky k DP.