Diplomová práce se zabývá vlivy jiných mikrobů a fungicidů působích na tvorbu trichothecenových mykotoxinů (T-2 toxin a deoxynivalenon) produkovaných plísněmi rodu Fusarium. Růst plísní rodu Fusarium byl sledován na různých kultivačních médiích. U všech testovaných kmenů byla provedena metoda PCR pro potvrzení přítomnosti Tri5 genu, který kóduje tvorbu trichothecenových mykotoxinů. Pouze izolát z rohože gen neobsahoval. Na různých kultivačních médiích byla sledována produkce trichothecenových toxinů u třech sbírkových kmenů a jednoho kmene izolovaného ze vzorku pšenice. Toxiny byly extrahovány acetonitrilem a zakoncentrovány na vakuovém koncentrátoru. Stanovení obsahu T-2 toxinu a deoxynivalenonu bylo provedeno pomocí ELISA TEST kitu. U F. graminearum CCM F ? 683 a izolátu z pšenice bylo sledováno ovlivnění produkce trichothecenových toxinů za přítomnosti jiných mikrobů (Pantoea agglomerans CCM 298, Pseudomonas aeruginosa) a fungicidů (Horizon 250 EW, Falcon 460 EC).
Anotace v angličtině
This diploma thesis deals with the influence of microbs and fungicides which affect the Fusarium fungi trichothecene mycotoxins (T-2 toxin and deoxynivalenon) synthesis. The Fusarium fungi cultivation of different culture media was observed. For all tested strains, there were performed the PCR method for confirmation of Tri5 gene which encodes the production trichothecene mycotoxins. Just the doormant isolate was negative. The trichothecene toxins production of different cultur was examined for three pure strains and one strain from wheat isolated. The toxins were extracted with acetonitrile. The concentration of targeted toxins was performed using the vacuum concentrator. The T-2 toxin and deoxynivalenon toxins analysis was performed using the ELISA test set. By F. graminearum CCM F ? 683 and from wheat isolate was observed the influence of microbs (Pantoea agglomerans CCM 298, Pseudomonas aeruginosa) and fungicides (Horizon 250 EW, Falcon 460 EC) at targeted toxins production.
Klíčová slova
rod Fusarium, Pantoea agglomerans, Pseudomonas aeruginosa,mykotoxiny,fungicidy, PCR, stanovení mykotoxinů
Klíčová slova v angličtině
genus Fusarium, Pantoea agglomerans, Pseudomonas aeruginosa, mycotoxin, fungicide, PCR, determination of mycotoxins
Rozsah průvodní práce
-
Jazyk
CZ
Anotace
Diplomová práce se zabývá vlivy jiných mikrobů a fungicidů působích na tvorbu trichothecenových mykotoxinů (T-2 toxin a deoxynivalenon) produkovaných plísněmi rodu Fusarium. Růst plísní rodu Fusarium byl sledován na různých kultivačních médiích. U všech testovaných kmenů byla provedena metoda PCR pro potvrzení přítomnosti Tri5 genu, který kóduje tvorbu trichothecenových mykotoxinů. Pouze izolát z rohože gen neobsahoval. Na různých kultivačních médiích byla sledována produkce trichothecenových toxinů u třech sbírkových kmenů a jednoho kmene izolovaného ze vzorku pšenice. Toxiny byly extrahovány acetonitrilem a zakoncentrovány na vakuovém koncentrátoru. Stanovení obsahu T-2 toxinu a deoxynivalenonu bylo provedeno pomocí ELISA TEST kitu. U F. graminearum CCM F ? 683 a izolátu z pšenice bylo sledováno ovlivnění produkce trichothecenových toxinů za přítomnosti jiných mikrobů (Pantoea agglomerans CCM 298, Pseudomonas aeruginosa) a fungicidů (Horizon 250 EW, Falcon 460 EC).
Anotace v angličtině
This diploma thesis deals with the influence of microbs and fungicides which affect the Fusarium fungi trichothecene mycotoxins (T-2 toxin and deoxynivalenon) synthesis. The Fusarium fungi cultivation of different culture media was observed. For all tested strains, there were performed the PCR method for confirmation of Tri5 gene which encodes the production trichothecene mycotoxins. Just the doormant isolate was negative. The trichothecene toxins production of different cultur was examined for three pure strains and one strain from wheat isolated. The toxins were extracted with acetonitrile. The concentration of targeted toxins was performed using the vacuum concentrator. The T-2 toxin and deoxynivalenon toxins analysis was performed using the ELISA test set. By F. graminearum CCM F ? 683 and from wheat isolate was observed the influence of microbs (Pantoea agglomerans CCM 298, Pseudomonas aeruginosa) and fungicides (Horizon 250 EW, Falcon 460 EC) at targeted toxins production.
Klíčová slova
rod Fusarium, Pantoea agglomerans, Pseudomonas aeruginosa,mykotoxiny,fungicidy, PCR, stanovení mykotoxinů
Klíčová slova v angličtině
genus Fusarium, Pantoea agglomerans, Pseudomonas aeruginosa, mycotoxin, fungicide, PCR, determination of mycotoxins
Zásady pro vypracování
1. Vypracujte rešerši na dané téma, zaměřte se zejména na biologické faktory ovlivňující
produkci mykotoxinů obecně. Vyhledejte údaje o vlivech působících na tvorbu fusariových toxinů.
2. Ověřte růst vybraných kmenů fusarií na různých kultivačních médiích (rychlost růstu, zbarvení kolonií, tvorba konidií atd).
3. Pomocí metody PCR zjistěte, zda vybrané kmeny obsahují gen pro produkci fusariových toxinů
4. Sledujte, jak u těchto kmenů ovlivňují vybrané biologické a chemické faktory (přítomnost dalších mikroorganismů, kultivační médium atd) produkci toxinů. Toxiny vyizolujte a detekujte pomocí komerčně vyráběných setů.
Zásady pro vypracování
1. Vypracujte rešerši na dané téma, zaměřte se zejména na biologické faktory ovlivňující
produkci mykotoxinů obecně. Vyhledejte údaje o vlivech působících na tvorbu fusariových toxinů.
2. Ověřte růst vybraných kmenů fusarií na různých kultivačních médiích (rychlost růstu, zbarvení kolonií, tvorba konidií atd).
3. Pomocí metody PCR zjistěte, zda vybrané kmeny obsahují gen pro produkci fusariových toxinů
4. Sledujte, jak u těchto kmenů ovlivňují vybrané biologické a chemické faktory (přítomnost dalších mikroorganismů, kultivační médium atd) produkci toxinů. Toxiny vyizolujte a detekujte pomocí komerčně vyráběných setů.
Seznam doporučené literatury
Podle pokynů vedoucí práce.
Seznam doporučené literatury
Podle pokynů vedoucí práce.
Přílohy volně vložené
-
Přílohy vázané v práci
-
Převzato z knihovny
Ne
Plný text práce
Přílohy
Posudek(y) oponenta
Hodnocení vedoucího
Záznam průběhu obhajoby
Studentka přednesla obhajobu své diplomové práce a zodpověděla dotazy zkušební komise.