Disertační práce se zabývá možnostmi úplné dvoudimenzionální chromatografie na analýzu přírodních fenolických látek. Výzkum byl zaměřen na volbu stacionárních fází, s cílem dosažení co největší ortogonality systému a rozdílné selektivity separace v obou dimenzích. Testovány byly RP a HILIC stacionární fáze. U HILIC kolon byl pozorován duální retenční mechanismus. Byly porovnávány různé gradienty, použitelné v úplné dvoudimenzionální chromatografii, pro dosažení co největší píkové kapacity a ortogonality 2D systému. Gradienty v první i v druhé dimenzi byly optimalizovány pomocí okénkových diagramů. Dále byl studován vliv dávkovaného objemu a složení rozpouštědla na separaci.
Anotace v angličtině
The comprehensive two dimensional liquid chromatography for analysis of natural antioxidants was studied in this disertation. The combination of stationary phases in two dimensional system was selected to provide very different chromatographic selectivity in both dimensions and high degree of orthogonality of 2D system. The RP and HILIC stationary phases were tested. The dual HILIC-RP retention mechanism was observed on all polar columns tested. Various types of second-dimension gradients in comprehensive LCxLC are compared. The effects of the gradient type on the bandwidths, peak capacity, orthogonality and separation time were investigated.The gradients in the first and second dimension were optimized using the windowdiagram method. The effect of the volume of samples on the band broadening and peak splitting was studied.
Klíčová slova
Úplná dvoudimenzionální kapalinová chromatografie, chromatografie na reversních fázích, chromatografie hydrofilních interakcí, přírodní antioxidanty, fenolické látky, flavony, gradientová eluce
Disertační práce se zabývá možnostmi úplné dvoudimenzionální chromatografie na analýzu přírodních fenolických látek. Výzkum byl zaměřen na volbu stacionárních fází, s cílem dosažení co největší ortogonality systému a rozdílné selektivity separace v obou dimenzích. Testovány byly RP a HILIC stacionární fáze. U HILIC kolon byl pozorován duální retenční mechanismus. Byly porovnávány různé gradienty, použitelné v úplné dvoudimenzionální chromatografii, pro dosažení co největší píkové kapacity a ortogonality 2D systému. Gradienty v první i v druhé dimenzi byly optimalizovány pomocí okénkových diagramů. Dále byl studován vliv dávkovaného objemu a složení rozpouštědla na separaci.
Anotace v angličtině
The comprehensive two dimensional liquid chromatography for analysis of natural antioxidants was studied in this disertation. The combination of stationary phases in two dimensional system was selected to provide very different chromatographic selectivity in both dimensions and high degree of orthogonality of 2D system. The RP and HILIC stationary phases were tested. The dual HILIC-RP retention mechanism was observed on all polar columns tested. Various types of second-dimension gradients in comprehensive LCxLC are compared. The effects of the gradient type on the bandwidths, peak capacity, orthogonality and separation time were investigated.The gradients in the first and second dimension were optimized using the windowdiagram method. The effect of the volume of samples on the band broadening and peak splitting was studied.
Klíčová slova
Úplná dvoudimenzionální kapalinová chromatografie, chromatografie na reversních fázích, chromatografie hydrofilních interakcí, přírodní antioxidanty, fenolické látky, flavony, gradientová eluce
Předseda komise prof. Ventura představil disertanta a seznámil komisi s jeho základními životopisnými daty. Přečteny posudky školitele a vedoucího školícího pracoviště. Následně disertant přednesl krátký výklad své disertační práce. Přítomní oponenti přečetli své oponentní posudky a disertant se vyjádřil k jejich připomínkám. Konstatováno, že nepřišly žádné připomínky zvenčí. Následovala diskuse:
doc. Fischer - otázka kvantifikace a limitu detekce
prof. Jandera, doc. Mikšík - transfer frakcí mezi 1. a 2. dimenzí
doc. Červenka - aplikace na reálné vzorky (víno).
Následovala neveřejná část diskuse, kde členové komise se kladně vyjádřili k vystoupení disertanta. Obhajoba byla zakončena tajným hlasováním.