Cílem této diplomové práce byla konstrukce elektrochemického imunomagnetického biosenzoru pro kvantitativní detekci ovalbuminu. Celý systém je založen na tvorbě imunokomplexu mezi primárními antiovalbuminovými protilátkami (IgG) imobilizovanými na magnetických částicích a ovalbuminu jako antigenu. Vzniklý imunokomplex je detekován pomocí sekundárních anti-ovalbuminových protilátek (IgG) značených křenovou peroxidázou (HRP). Úbytek substrátu peroxidu vodíku je měřen elektrochemicky pomocí miniaturizovaných tištěných senzorů metodou lineární voltametrie. Při konstrukci elektrochemického imunomagnetického biosenzoru jsme se zaměřili na vyhledávání nejoptimálnějších magnetických částic pro imobilizaci primárních antiovalbuminových protilátek, nalezení optimálního množství ředění konjugátu a substrátu a na ověření možnosti opakovaného použití tištěných senzorů.
Anotace v angličtině
The aim of the thesis was preparation of electrochemical immunomagnetic biosensor for quantitative ovalbumin detection. The whole system is based on the immunocomplex formation composed of primary anti-ovalbumin antibodies (IgG) immobilized on the magnetic particles and ovalbumin as an antigen. The resulting immunocomplex is detected using the secondary antiovalbumin antibodies (IgG) labeled with horseradish peroxidase (HRP). Decrease of hydrogen peroxide substrate was measured electrochemically using miniaturized threeelectrode printed sensors with linear voltammetry. During the construction of electrochemical immunomagnetic biosensor we focused on selection of convenient magnetic particles for immobilization of primary antiovalbumin antibodies, determination of optimal conjugate and substrate dilution, and finally confirmed the possibility of re-use of screen printed sensors.
ovalbumin, anti-ovalbumin IgG antibodies, magnetic particles, immunosensor
Rozsah průvodní práce
-
Jazyk
CZ
Anotace
Cílem této diplomové práce byla konstrukce elektrochemického imunomagnetického biosenzoru pro kvantitativní detekci ovalbuminu. Celý systém je založen na tvorbě imunokomplexu mezi primárními antiovalbuminovými protilátkami (IgG) imobilizovanými na magnetických částicích a ovalbuminu jako antigenu. Vzniklý imunokomplex je detekován pomocí sekundárních anti-ovalbuminových protilátek (IgG) značených křenovou peroxidázou (HRP). Úbytek substrátu peroxidu vodíku je měřen elektrochemicky pomocí miniaturizovaných tištěných senzorů metodou lineární voltametrie. Při konstrukci elektrochemického imunomagnetického biosenzoru jsme se zaměřili na vyhledávání nejoptimálnějších magnetických částic pro imobilizaci primárních antiovalbuminových protilátek, nalezení optimálního množství ředění konjugátu a substrátu a na ověření možnosti opakovaného použití tištěných senzorů.
Anotace v angličtině
The aim of the thesis was preparation of electrochemical immunomagnetic biosensor for quantitative ovalbumin detection. The whole system is based on the immunocomplex formation composed of primary anti-ovalbumin antibodies (IgG) immobilized on the magnetic particles and ovalbumin as an antigen. The resulting immunocomplex is detected using the secondary antiovalbumin antibodies (IgG) labeled with horseradish peroxidase (HRP). Decrease of hydrogen peroxide substrate was measured electrochemically using miniaturized threeelectrode printed sensors with linear voltammetry. During the construction of electrochemical immunomagnetic biosensor we focused on selection of convenient magnetic particles for immobilization of primary antiovalbumin antibodies, determination of optimal conjugate and substrate dilution, and finally confirmed the possibility of re-use of screen printed sensors.
ovalbumin, anti-ovalbumin IgG antibodies, magnetic particles, immunosensor
Zásady pro vypracování
1) Teoretická část:
a) Obecný úvod o ovalbuminu s ohledem na jeho alergenní potenciál, o možnostech jeho stanovení různými metodami.
b) Stručná rešerše o rozdělení biosenzorů, s podrobnějším zaměřením na imunosenzory a možných kombinacích s magnetickými částicemi.
c) Zpracovat nejnovější informace o možnostech elektrochemického stanovení ovalbuminu.
2) Experimentální část:
a) Optimalizace podmínek imobilizace primárních anti-ovalbuminových protilátek na magnetické nosiče.
b) Optimalizace ředění substrátu peroxidu vodíku s ohledem na možné opakované využití tištěných tříelektrodových senzorů.
c) Kvantitativní stanovení ovalbuminu pomocí systému anti-OVA IgG/OVA/anti-OVA-IgGHRP.
Zásady pro vypracování
1) Teoretická část:
a) Obecný úvod o ovalbuminu s ohledem na jeho alergenní potenciál, o možnostech jeho stanovení různými metodami.
b) Stručná rešerše o rozdělení biosenzorů, s podrobnějším zaměřením na imunosenzory a možných kombinacích s magnetickými částicemi.
c) Zpracovat nejnovější informace o možnostech elektrochemického stanovení ovalbuminu.
2) Experimentální část:
a) Optimalizace podmínek imobilizace primárních anti-ovalbuminových protilátek na magnetické nosiče.
b) Optimalizace ředění substrátu peroxidu vodíku s ohledem na možné opakované využití tištěných tříelektrodových senzorů.
c) Kvantitativní stanovení ovalbuminu pomocí systému anti-OVA IgG/OVA/anti-OVA-IgGHRP.
Seznam doporučené literatury
Podle pokynů vedoucího diplomové práce.
Seznam doporučené literatury
Podle pokynů vedoucího diplomové práce.
Přílohy volně vložené
-
Přílohy vázané v práci
-
Převzato z knihovny
Ne
Plný text práce
Přílohy
Posudek(y) oponenta
Hodnocení vedoucího
Záznam průběhu obhajoby
1) Prezentace výsledků diplomové práce
2) Diskuze k posudkům vedoucího a oponenta diplomové práce
3) Diplomantka zodpověděla všechny dotazy a připomínky k diplomové práce