Tématem této práce je především optimalizace metodiky syntézy, separace a detekce CdTe nanokrystalů a jejich konjugátů s biomolekulami pro účely fyziologického výzkumu a molekulární diagnostiky. Luminiscenční sondy byly připraveny konjugací luminiscenčních sloučenin s biomolekulou. Jako luminiscenční značky byly použity CdTe polovodičové nanokrystaly - kvantové tečky. Takto značené molekuly jsme detekovali pomocí kapilární zónové elektroforézy s laserem indukovanou fluorescenční detekcí. Cílem této práce je vývoj a optimalizace metody značení biologicky významných molekul kvantovými tečkami pomocí tzv. "zero-length crosslinkerů" pro jejich budoucí aplikaci ve funkční diagnostice apoptotických a nádorových buněk.
Anotace v angličtině
The main themes of this thesis are optimize the synthesis methodology, separation and detection of CdTe nanocrystals and their conjugates with biomolecules for the purpose of physiological research and molecular diagnostics. Luminescence probes were prepared by conjugation of luminescent compound with biomolecules. CdTe semiconductor nanocrystals - quantum dots were used as luminescent markers. Prepared conjugates were detected by capillary zone electrophoresis with laser induced fluorescence detection. The aim of this work is to develop and optimize methods for labeling biologically important molecules with quantum dots via "zero-length crosslinkers" for their future application in functional diagnostic of apoptotic and tumor cells.
Klíčová slova
kvantové tečky, kapilární elektroforéza, luminescenční sondy
Tématem této práce je především optimalizace metodiky syntézy, separace a detekce CdTe nanokrystalů a jejich konjugátů s biomolekulami pro účely fyziologického výzkumu a molekulární diagnostiky. Luminiscenční sondy byly připraveny konjugací luminiscenčních sloučenin s biomolekulou. Jako luminiscenční značky byly použity CdTe polovodičové nanokrystaly - kvantové tečky. Takto značené molekuly jsme detekovali pomocí kapilární zónové elektroforézy s laserem indukovanou fluorescenční detekcí. Cílem této práce je vývoj a optimalizace metody značení biologicky významných molekul kvantovými tečkami pomocí tzv. "zero-length crosslinkerů" pro jejich budoucí aplikaci ve funkční diagnostice apoptotických a nádorových buněk.
Anotace v angličtině
The main themes of this thesis are optimize the synthesis methodology, separation and detection of CdTe nanocrystals and their conjugates with biomolecules for the purpose of physiological research and molecular diagnostics. Luminescence probes were prepared by conjugation of luminescent compound with biomolecules. CdTe semiconductor nanocrystals - quantum dots were used as luminescent markers. Prepared conjugates were detected by capillary zone electrophoresis with laser induced fluorescence detection. The aim of this work is to develop and optimize methods for labeling biologically important molecules with quantum dots via "zero-length crosslinkers" for their future application in functional diagnostic of apoptotic and tumor cells.
Klíčová slova
kvantové tečky, kapilární elektroforéza, luminescenční sondy
1) Teoretická část bude obsahovat úkoly:
Fyzikální a chemické principy fluorescence a luminiscence
Princip kapilární elektroforézy s detekcí laserem indukované fluorescence
Teorie elektromigrace koloidních částic
Moderní fluorescenční sondy
Metody syntézy imunofluorescenčních sond
Metody přípravy vzorku
2) Experimentální část bude obsahovat dílčí úkoly:
Konjugace kvantových teček s proteiny
Analýza kvantových teček a jejich konjugátů pomocí kapilární elektroforézy s detekcí laserem indukované fluorescence
Vyhodnocení měřených dat
Interpretace výsledků
Zásady pro vypracování
1) Teoretická část bude obsahovat úkoly:
Fyzikální a chemické principy fluorescence a luminiscence
Princip kapilární elektroforézy s detekcí laserem indukované fluorescence
Teorie elektromigrace koloidních částic
Moderní fluorescenční sondy
Metody syntézy imunofluorescenčních sond
Metody přípravy vzorku
2) Experimentální část bude obsahovat dílčí úkoly:
Konjugace kvantových teček s proteiny
Analýza kvantových teček a jejich konjugátů pomocí kapilární elektroforézy s detekcí laserem indukované fluorescence
Vyhodnocení měřených dat
Interpretace výsledků
Seznam doporučené literatury
1. Lakowicz J (2006) Principles of fluorescence spectroscopy, 3rd edn. Springer Science, New York
2. Eychmuller A, Rogach AL (2000) Chemistry and photophysics of thiol-stabilized II-VI semiconductor nanocrystals. Pure and Applied Chemistry 72 (1-2):179-188
3. Pyell U (2010) Characterization of nanoparticles by capillary electromigration separation techniques. Electrophoresis 31 (5):814-831
4. Hermanson G (1996) Bioconjugate techniques. Elsevier, San Diego.
Seznam doporučené literatury
1. Lakowicz J (2006) Principles of fluorescence spectroscopy, 3rd edn. Springer Science, New York
2. Eychmuller A, Rogach AL (2000) Chemistry and photophysics of thiol-stabilized II-VI semiconductor nanocrystals. Pure and Applied Chemistry 72 (1-2):179-188
3. Pyell U (2010) Characterization of nanoparticles by capillary electromigration separation techniques. Electrophoresis 31 (5):814-831
4. Hermanson G (1996) Bioconjugate techniques. Elsevier, San Diego.
Přílohy volně vložené
-
Přílohy vázané v práci
-
Převzato z knihovny
Ne
Plný text práce
Přílohy
Posudek(y) oponenta
Hodnocení vedoucího
Záznam průběhu obhajoby
1) Prezentace výsledků diplomové práce
2) Diskuze k posudkům vedoucího a oponenta diplomové práce
3) Diplomant zodpověděl všechny dotazy a připomínky k DP