Tato bakalářská práce se zabývá ?9-desaturasou (SCD-1) jakožto potenciálním markerem metabolického syndromu a jeho možným vlivem na vznik inzulínové rezistence. Zkoumá zastoupení mastných kyselin v jednotlivých lipidových frakcích a aktivitu SCD-1 u pacientů s diagnózou diabetes mellitus 2. typu v porovnání se zdravými jedinci. Vzorky krevní plazmy byly zpracovány preparativní metodou tenkovrstvé chromatografie (TLC) a kapilární plynovou chromatografií. TLC slouží k rozdělení lipidů do jednotlivých frakcí. Hodnoty obsahu mastných kyselin byly zjištěny pomocí plynové chromatografie. Vzorky anonymních pacientů byly rozděleny do tří skupin podle obsahu glykovaného hemoglobinu. Cílem této práce je verifikace vztahu mezi SCD-1 a rozvojem inzulínové rezistence. Dále je cílem posouzení, zda je SCD-1 vhodným markerem pro diabetes mellitus typu 2 a zda je případné začlenění SCD-1 a použitá metoda vhodné pro rutinní diagnostiku. U studovaných léčených diabetiků nebyl prokázán pokles aktivity SCD-1 oproti zdravým jedincům, což může být výsledkem podávání antidiabetických léčiv. Ze stanovení obsahu mastných kyselin byl ovšem patrný výrazný pokles PUFA ve všech frakcích. Tyto výsledky budou dále studovány.
Anotace v angličtině
This thesis deals with ?9-desaturase (SCD-1) as a potentional marker of metabolic syndrome and its possible influence on the emergence of insulin resistance. It examines the representation of individual fatty acids in lipid fractions and activity of SCD-1 in patients with a diagnosis diabetes mellitus type 2 compared to healthy subjects. Blood plasma samples were analyzed by preparative thin-layer chromatography (TLC) and capillary gas chromatography. TLC is used to separate lipids into individual fractions. Values of fatty acids concentrations were identified by gas chromatography. Samples of anonymous patients were divided into three groups according to amount of glycated hemoglobin. The aim of this work is to verify the relationship between SCD-1 and the development of insulin resistance. Further objective is to assess whether SCD-1 is a suitable marker for diabetes mellitus type 2 and whether the eventual inclusion of SCD-1 and used method is suitable fo routine diagnostics. There was no evidence in decreased activity of SCD-1 for treated diabetics compared to healthy subjects, wich may result from use of antidiabetic drugs. However, from the determination of fatty acids was evident a significant decrease in PUFA in all fractions. These results will undergo further investigation.
Tato bakalářská práce se zabývá ?9-desaturasou (SCD-1) jakožto potenciálním markerem metabolického syndromu a jeho možným vlivem na vznik inzulínové rezistence. Zkoumá zastoupení mastných kyselin v jednotlivých lipidových frakcích a aktivitu SCD-1 u pacientů s diagnózou diabetes mellitus 2. typu v porovnání se zdravými jedinci. Vzorky krevní plazmy byly zpracovány preparativní metodou tenkovrstvé chromatografie (TLC) a kapilární plynovou chromatografií. TLC slouží k rozdělení lipidů do jednotlivých frakcí. Hodnoty obsahu mastných kyselin byly zjištěny pomocí plynové chromatografie. Vzorky anonymních pacientů byly rozděleny do tří skupin podle obsahu glykovaného hemoglobinu. Cílem této práce je verifikace vztahu mezi SCD-1 a rozvojem inzulínové rezistence. Dále je cílem posouzení, zda je SCD-1 vhodným markerem pro diabetes mellitus typu 2 a zda je případné začlenění SCD-1 a použitá metoda vhodné pro rutinní diagnostiku. U studovaných léčených diabetiků nebyl prokázán pokles aktivity SCD-1 oproti zdravým jedincům, což může být výsledkem podávání antidiabetických léčiv. Ze stanovení obsahu mastných kyselin byl ovšem patrný výrazný pokles PUFA ve všech frakcích. Tyto výsledky budou dále studovány.
Anotace v angličtině
This thesis deals with ?9-desaturase (SCD-1) as a potentional marker of metabolic syndrome and its possible influence on the emergence of insulin resistance. It examines the representation of individual fatty acids in lipid fractions and activity of SCD-1 in patients with a diagnosis diabetes mellitus type 2 compared to healthy subjects. Blood plasma samples were analyzed by preparative thin-layer chromatography (TLC) and capillary gas chromatography. TLC is used to separate lipids into individual fractions. Values of fatty acids concentrations were identified by gas chromatography. Samples of anonymous patients were divided into three groups according to amount of glycated hemoglobin. The aim of this work is to verify the relationship between SCD-1 and the development of insulin resistance. Further objective is to assess whether SCD-1 is a suitable marker for diabetes mellitus type 2 and whether the eventual inclusion of SCD-1 and used method is suitable fo routine diagnostics. There was no evidence in decreased activity of SCD-1 for treated diabetics compared to healthy subjects, wich may result from use of antidiabetic drugs. However, from the determination of fatty acids was evident a significant decrease in PUFA in all fractions. These results will undergo further investigation.
Teoretická část:
1. Vypracujte literární rešerši se zaměřením na význam \recke{Delta}9-desaturázy pro regulaci lipidového
metabolizmus diabetiků.
2. Popište metodiku stanovení významných lipidů, mastných kyselin a postupy pro výpočet aktivity
desaturáz.
Praktická část:
1. U diabetiků se středním a těžkým postižením a u kontrolní skupiny proveďte
rozdělení EDTA plazmy do pěti tříd (fosfolipidy, diacylglyceroly, mastné kyseliny,
triacylglyceroly a estery cholesterolu) pomocí preparativní chromatografie na tenké
vrstvě a stanovte jejich koncentrace.
2. Stanovte obsah nasycených a nenasycených mastných kyselin ve všech třídách lipidů
pomocí plynové chromatografie.
3. Vypočtěte aktivity \recke{Delta}9-desaturázy ve všech třídách lipidů u diabetiků a
kontrolní skupiny a vypracujte jejich závislost na krevních parametrech.
4. Proveďte statistické vyhodnocení výsledků a diskutujte jejich použitelnost pro
diagnostické účely.
Zásady pro vypracování
Teoretická část:
1. Vypracujte literární rešerši se zaměřením na význam \recke{Delta}9-desaturázy pro regulaci lipidového
metabolizmus diabetiků.
2. Popište metodiku stanovení významných lipidů, mastných kyselin a postupy pro výpočet aktivity
desaturáz.
Praktická část:
1. U diabetiků se středním a těžkým postižením a u kontrolní skupiny proveďte
rozdělení EDTA plazmy do pěti tříd (fosfolipidy, diacylglyceroly, mastné kyseliny,
triacylglyceroly a estery cholesterolu) pomocí preparativní chromatografie na tenké
vrstvě a stanovte jejich koncentrace.
2. Stanovte obsah nasycených a nenasycených mastných kyselin ve všech třídách lipidů
pomocí plynové chromatografie.
3. Vypočtěte aktivity \recke{Delta}9-desaturázy ve všech třídách lipidů u diabetiků a
kontrolní skupiny a vypracujte jejich závislost na krevních parametrech.
4. Proveďte statistické vyhodnocení výsledků a diskutujte jejich použitelnost pro
diagnostické účely.
Seznam doporučené literatury
Podle pokynů vedoucího bakalářské práce.
Seznam doporučené literatury
Podle pokynů vedoucího bakalářské práce.
Přílohy volně vložené
-
Přílohy vázané v práci
-
Převzato z knihovny
Ne
Plný text práce
Přílohy
Posudek(y) oponenta
Hodnocení vedoucího
Záznam průběhu obhajoby
1. Prezentace výsledků bakalářské práce
2. Diskuze k posudkům vedoucího bakalářské práce
3. Student zodpověděl všechny dotazy k bakalářské práci