- Následující požadované údaje nejsou u této VŠKP vyplněny: Název v angličtině, Anotace, Anotace v angličtině, Klíčová slova, Klíčová slova v angličtině
Hlavní téma
Optimalizace preanalytické fáze při fluorometrickém stanovení glutathionu
Hlavní téma v angličtině
Estimation of preanalytical protocol in fluorometric glutathione assay
Název dle studenta
Optimalizace preanalytické fáze při fluorometrickém stanovení glutathionu
1.) Zpracujte literární rešerši zaměřenou na podrobný popis antioxidačních funkcí glutathionu a lokalizaci obou jeho forem v buňce. Dále popište možnosti stanovení glutathionu, zejména se zaměřte na spektrofluorometrické stanovení a možností zpracování biologického materiálu v rámci této metody. Ke zpracování teoretické práce využijte elektronické databáze (ScienceDirect, NCBI Pubmed, HighWire).
2.) Získané poznatky využijte při testování jednotlivých parametrů preanalytické fáze na stanovení hladin redukovaného glutathionu (GSH) v biologickém materiálu, zejména v jaterním homogenátu potkanů. Během této optimalizace se zaměřte hlavně na testování druhu deproteinačního činidla, teplotu a dobu zpracování vzorků. Pro určení míry poklesu hladiny glutathionu v závislosti na postupu zpracování využijte kalibrační řadu GSH standardů. Ke stanovení koncentrace redukovaného glutathionu ve vzorcích a standardech využijte zavedenou spektrofluorometrickou metodu. Zbytkovou koncentraci proteinů po deproteinaci stanovte pomocí metody dle Bradforda.
3.) Získaná experimentální data podrobně zpracujte a určete optimální podmínky zpracování biologického materiálu. Porovnejte výsledky s výstupy jiných autorů.
Zásady pro vypracování
1.) Zpracujte literární rešerši zaměřenou na podrobný popis antioxidačních funkcí glutathionu a lokalizaci obou jeho forem v buňce. Dále popište možnosti stanovení glutathionu, zejména se zaměřte na spektrofluorometrické stanovení a možností zpracování biologického materiálu v rámci této metody. Ke zpracování teoretické práce využijte elektronické databáze (ScienceDirect, NCBI Pubmed, HighWire).
2.) Získané poznatky využijte při testování jednotlivých parametrů preanalytické fáze na stanovení hladin redukovaného glutathionu (GSH) v biologickém materiálu, zejména v jaterním homogenátu potkanů. Během této optimalizace se zaměřte hlavně na testování druhu deproteinačního činidla, teplotu a dobu zpracování vzorků. Pro určení míry poklesu hladiny glutathionu v závislosti na postupu zpracování využijte kalibrační řadu GSH standardů. Ke stanovení koncentrace redukovaného glutathionu ve vzorcích a standardech využijte zavedenou spektrofluorometrickou metodu. Zbytkovou koncentraci proteinů po deproteinaci stanovte pomocí metody dle Bradforda.
3.) Získaná experimentální data podrobně zpracujte a určete optimální podmínky zpracování biologického materiálu. Porovnejte výsledky s výstupy jiných autorů.
Seznam doporučené literatury
Podle pokynů vedoucího diplomové práce.
Seznam doporučené literatury
Podle pokynů vedoucího diplomové práce.
Přílohy volně vložené
-
Přílohy vázané v práci
-
Převzato z knihovny
Ne
Plný text práce
Přílohy
Posudek(y) oponenta
Hodnocení vedoucího
Záznam průběhu obhajoby
1. Prezentace výsledků diplomové práce
2. Diskuze k posudkům vedoucího a oponenta diplomové práce
3. Diplomantka zodpověděla všechny dotazy a připomínky k DP