Tato práce popisuje základní charakteristiky plazmidů jako nosičů DNA, dále zkoumá metody amplifikace a izolace plazmidové DNA v hostitelských buňkách bakterie Escherichia coli, přípravu kompetentních buněk E. coli a metody transformace. Předmětem výzkumu je i vliv kapalných obohacených médií na průběh a výtěžnost amplifikace plazmidů a kvantitativní měření koncentrace a ověření čistoty izolované plazmidové DNA.
Anotace v angličtině
This work describes basic characteristics of the plasmid DNA vectors, methods of plasmid DNA amplification and isolation in bacterial host cells Escherichia coli and is interested in process of preparing competent cells and their transformation. The object of this research is also effect of enrichment liquid media on the process and yield of plasmid amplification and quantitative measuring concentration and purity verifying of isolated plasmid DNA.
plasmid DNA, competent strains of Escherichia coli, transformation, amplification, isolation, gel electrophoresis
Rozsah průvodní práce
86
Jazyk
CZ
Anotace
Tato práce popisuje základní charakteristiky plazmidů jako nosičů DNA, dále zkoumá metody amplifikace a izolace plazmidové DNA v hostitelských buňkách bakterie Escherichia coli, přípravu kompetentních buněk E. coli a metody transformace. Předmětem výzkumu je i vliv kapalných obohacených médií na průběh a výtěžnost amplifikace plazmidů a kvantitativní měření koncentrace a ověření čistoty izolované plazmidové DNA.
Anotace v angličtině
This work describes basic characteristics of the plasmid DNA vectors, methods of plasmid DNA amplification and isolation in bacterial host cells Escherichia coli and is interested in process of preparing competent cells and their transformation. The object of this research is also effect of enrichment liquid media on the process and yield of plasmid amplification and quantitative measuring concentration and purity verifying of isolated plasmid DNA.
plasmid DNA, competent strains of Escherichia coli, transformation, amplification, isolation, gel electrophoresis
Zásady pro vypracování
1) Teoretická část:
" plazmidy jako nosiče DNA, amplifikace
" Escherichia coli, kompetentní bakterie, vlastnosti různých kmenů, transformace, kultivační podmínky
" izolace plazmidové DNA
2) Praktická část:
" transformace bakterií
" kultivace E. coli
" příprava kultivačních médií
" izolace pDNA, kontrola kvality, měření koncentrace
" elektroforéza nukleových kyselin
Zásady pro vypracování
1) Teoretická část:
" plazmidy jako nosiče DNA, amplifikace
" Escherichia coli, kompetentní bakterie, vlastnosti různých kmenů, transformace, kultivační podmínky
" izolace plazmidové DNA
2) Praktická část:
" transformace bakterií
" kultivace E. coli
" příprava kultivačních médií
" izolace pDNA, kontrola kvality, měření koncentrace
" elektroforéza nukleových kyselin
Seznam doporučené literatury
Podle pokynů vedoucího diplomové práce.
Seznam doporučené literatury
Podle pokynů vedoucího diplomové práce.
Přílohy volně vložené
1 DVD
Přílohy vázané v práci
ilustrace, grafy, tabulky
Převzato z knihovny
Ne
Plný text práce
Přílohy
Posudek(y) oponenta
Hodnocení vedoucího
Záznam průběhu obhajoby
1. Prezentace výsledků diplomové práce
2. Diskuze k posudkům vedoucího a oponenta diplomové práce
3. Diplomantka zodpověděla všechny dotazy a připomínky k DP