V diplomové práci bylo provedeno studium inhibičního účinku 66 organokovových komplexů s centrálním atomem V, Nb a Mo. Testování bylo provedeno na nádorových liniích buněk MOLT-4 a HL-60. Jako vysoce cytotoxické pro obě linie buněk byly shledány komplexy vanadu a molybdenu s N,N´- chelátově vázaným fenantrolinem a jeho deriváty.
Na vysoce účiném komplexu vanadu (V16) a molybdenu (Mo13) byl studován mechanizmus cytotoxického účinku. Pomocí průtokové cytometrie, spektrálních metod a Western blottingu v kombinaci SDS-PAGE s imunochemickou detekcí bylo prokázáno, že oba dva testované komplexy indukují apoptózu prostřednictvím aktivace vnitřní apoptické dráhy u linie buněk MOLT-4 a Jurkat. U buněčné linie MOLT-4 bylo prokázáno zvýšení exprese tumor supresorového genu, proteinu p53 a jeho fosforylované formy na serinu 15 po působení V16 i Mo13.
Anotace v angličtině
In the diploma thesis, a study of the inhibition effect of 66 organometalic complexes with V, Nb and Mo as a central atom was made. The tests were done on the cancer cell lines MOLT-4 and HL-60. The complexes of V and Mo with the chelate-bounded phenantroline and its derivates were determined as highly cytotoxic for both cell lines.
The mecanism of the cytotoxic effect was studied on the highly efficient vanadium (V16) and molybdenum (Mo13). The induction of the apoptosis via an internal apoptic way activation at the MOLT-4 and Jurkat cell lines was established for both complexes with the flow cytometry, spectral methods and the Western blotting in a combination with the SDS-PAGE and an imunochemical detection. At the MOLT-4 cell line, an elevation of the expression of the tumor supressor gene, protein p53 and its fosforylated form on serin 15 was prooved for both V16 and Mo13.
V diplomové práci bylo provedeno studium inhibičního účinku 66 organokovových komplexů s centrálním atomem V, Nb a Mo. Testování bylo provedeno na nádorových liniích buněk MOLT-4 a HL-60. Jako vysoce cytotoxické pro obě linie buněk byly shledány komplexy vanadu a molybdenu s N,N´- chelátově vázaným fenantrolinem a jeho deriváty.
Na vysoce účiném komplexu vanadu (V16) a molybdenu (Mo13) byl studován mechanizmus cytotoxického účinku. Pomocí průtokové cytometrie, spektrálních metod a Western blottingu v kombinaci SDS-PAGE s imunochemickou detekcí bylo prokázáno, že oba dva testované komplexy indukují apoptózu prostřednictvím aktivace vnitřní apoptické dráhy u linie buněk MOLT-4 a Jurkat. U buněčné linie MOLT-4 bylo prokázáno zvýšení exprese tumor supresorového genu, proteinu p53 a jeho fosforylované formy na serinu 15 po působení V16 i Mo13.
Anotace v angličtině
In the diploma thesis, a study of the inhibition effect of 66 organometalic complexes with V, Nb and Mo as a central atom was made. The tests were done on the cancer cell lines MOLT-4 and HL-60. The complexes of V and Mo with the chelate-bounded phenantroline and its derivates were determined as highly cytotoxic for both cell lines.
The mecanism of the cytotoxic effect was studied on the highly efficient vanadium (V16) and molybdenum (Mo13). The induction of the apoptosis via an internal apoptic way activation at the MOLT-4 and Jurkat cell lines was established for both complexes with the flow cytometry, spectral methods and the Western blotting in a combination with the SDS-PAGE and an imunochemical detection. At the MOLT-4 cell line, an elevation of the expression of the tumor supressor gene, protein p53 and its fosforylated form on serin 15 was prooved for both V16 and Mo13.
Náplň diplomové práce:
Tato práce bude součástí studia, které má za úkol nalézt nové biologicky účinné organokovové komplexy přechodných kovů a popsat mechanismus jejich cytostatické aktivity.
Teoretická část bude obsahovat:
a) Na základě provedené literární rešerše popsat současné znalosti o antitumorových léčivech, mechanismu cytotoxického účinku a vlivu proteinu p53 na apoptózu se zaměřením na komplexy přechodných kovů.
Experimentální část bude obsahovat dílčí kroky:
a) Osvojit si techniky práce s buněčnými liniemi, jejich kultivaci a pasážování.
b) Provést stanovení cytotoxicity dostupných komplexů pomocí WST-1 testu.
c) U cytostaticky nejaktivnějších komplexů provést hodnocení cytotoxicity a indukce apoptózy (průtoková cytometrie, western blott metodika, kaspázy).
d) Naměřená data zpracovat za pomocí odpovídajících počítačových programů.
Zásady pro vypracování
Náplň diplomové práce:
Tato práce bude součástí studia, které má za úkol nalézt nové biologicky účinné organokovové komplexy přechodných kovů a popsat mechanismus jejich cytostatické aktivity.
Teoretická část bude obsahovat:
a) Na základě provedené literární rešerše popsat současné znalosti o antitumorových léčivech, mechanismu cytotoxického účinku a vlivu proteinu p53 na apoptózu se zaměřením na komplexy přechodných kovů.
Experimentální část bude obsahovat dílčí kroky:
a) Osvojit si techniky práce s buněčnými liniemi, jejich kultivaci a pasážování.
b) Provést stanovení cytotoxicity dostupných komplexů pomocí WST-1 testu.
c) U cytostaticky nejaktivnějších komplexů provést hodnocení cytotoxicity a indukce apoptózy (průtoková cytometrie, western blott metodika, kaspázy).
d) Naměřená data zpracovat za pomocí odpovídajících počítačových programů.
Seznam doporučené literatury
Podle pokynů vedoucího diplomové práce.
Seznam doporučené literatury
Podle pokynů vedoucího diplomové práce.
Přílohy volně vložené
-
Přílohy vázané v práci
-
Převzato z knihovny
Ne
Plný text práce
Přílohy
Posudek(y) oponenta
Hodnocení vedoucího
Záznam průběhu obhajoby
1. Prezentace výsledků diplomové práce
2. Diskuze k posudku vedoucího a oponenta diplomové práce.
3. Studentka zodpověděla všechny dotazy a připomínky k DP.