Hlavním tématem této práce je identifikace metabolitů tramadolu s využitím technik
kapalinové chromatografie s hmotnostní spektrometrií, hmotnostně spektrometrického
zobrazování, a také MALDI hmotnostně spektrometrické analýzy. Dále byla provedena
analýza vlivu vybraných matric na MALDI ionizaci ursodeoxycholové kyseliny UDCA a
tramadolu. V úvodu jsou stručně popsány výhody i nevýhody UPLC ? MS/MS a MALDI ?
UHRMSI techniky. Teoretická část se skládá z několika kapitol. První kapitola je zaměřena
na detailní popis nejčastějších enzymů a metabolických reakcí, podílejících se na
biotransformaci léčiv. Druhá kapitola pojednává o charakteristických vlastnostech a
farmakologických účincích vybraných léčiv. Zbývající kapitoly jsou věnovány na využití
hmotnostní spektrometrie, obzvláště hmotnostně spektrometrického zobrazování, při analýze
léčiv a jejich metabolitů. V experimentální části je popsána optimalizace UPLC podmínek pro
separaci tramadolu a jeho metabolitů. Dále jsou zde uvedeny údaje, týkající se veškerých
postupů, metodik, chemikálií a přístrojů, které byly využity během jednotlivých experimentů.
V poslední kapitole jsou diskutovány výsledky kvalitativní i kvantitativní analýzy tramadolu a
jeho metabolitů včetně jejich prostorové lokalizace ve vybraných vzorcích tkání a biotekutin.
Anotace v angličtině
The major topic of this thesis is the identification of tramadol metabolites using UPLC
? MS/MS, MALDI ? UHRSMSI and MALDI ? MS/MS technique. Advantages and
disadvantages of these techniques are briefly discussed in the introduction. A theoretical part
is divided into several chapters. The first chapter describes the most common enzymes and
metabolic reactions, which are participated in the drug biotransformation. The second chapter
deals with characteristic properties and pharmacological effects of selected drugs. Other
chapters are devoted to the theoretical background of mass spectrometry imaging and their
application in the drug metabolism studies. Experimental part includes an optimization of
UPLC conditions for separation of tramadol and its metabolites as well as description of used
methods, chemicals, procedures and instruments, used for individual experiments are said in
this part, too. Last chapter summarizes qualitative and quantitative results including
identification and localization of tramadol and its metabolites in selected rat tissue samples
and biofluids.
drug metabolism, mass spectrometry imaging, tramadol, UPLC ? MS/MS, UHRMSI, MALDI ? MS/MS
Rozsah průvodní práce
-
Jazyk
CZ
Anotace
Hlavním tématem této práce je identifikace metabolitů tramadolu s využitím technik
kapalinové chromatografie s hmotnostní spektrometrií, hmotnostně spektrometrického
zobrazování, a také MALDI hmotnostně spektrometrické analýzy. Dále byla provedena
analýza vlivu vybraných matric na MALDI ionizaci ursodeoxycholové kyseliny UDCA a
tramadolu. V úvodu jsou stručně popsány výhody i nevýhody UPLC ? MS/MS a MALDI ?
UHRMSI techniky. Teoretická část se skládá z několika kapitol. První kapitola je zaměřena
na detailní popis nejčastějších enzymů a metabolických reakcí, podílejících se na
biotransformaci léčiv. Druhá kapitola pojednává o charakteristických vlastnostech a
farmakologických účincích vybraných léčiv. Zbývající kapitoly jsou věnovány na využití
hmotnostní spektrometrie, obzvláště hmotnostně spektrometrického zobrazování, při analýze
léčiv a jejich metabolitů. V experimentální části je popsána optimalizace UPLC podmínek pro
separaci tramadolu a jeho metabolitů. Dále jsou zde uvedeny údaje, týkající se veškerých
postupů, metodik, chemikálií a přístrojů, které byly využity během jednotlivých experimentů.
V poslední kapitole jsou diskutovány výsledky kvalitativní i kvantitativní analýzy tramadolu a
jeho metabolitů včetně jejich prostorové lokalizace ve vybraných vzorcích tkání a biotekutin.
Anotace v angličtině
The major topic of this thesis is the identification of tramadol metabolites using UPLC
? MS/MS, MALDI ? UHRSMSI and MALDI ? MS/MS technique. Advantages and
disadvantages of these techniques are briefly discussed in the introduction. A theoretical part
is divided into several chapters. The first chapter describes the most common enzymes and
metabolic reactions, which are participated in the drug biotransformation. The second chapter
deals with characteristic properties and pharmacological effects of selected drugs. Other
chapters are devoted to the theoretical background of mass spectrometry imaging and their
application in the drug metabolism studies. Experimental part includes an optimization of
UPLC conditions for separation of tramadol and its metabolites as well as description of used
methods, chemicals, procedures and instruments, used for individual experiments are said in
this part, too. Last chapter summarizes qualitative and quantitative results including
identification and localization of tramadol and its metabolites in selected rat tissue samples
and biofluids.
drug metabolism, mass spectrometry imaging, tramadol, UPLC ? MS/MS, UHRMSI, MALDI ? MS/MS
Zásady pro vypracování
1. Vypracujte literární rešerši zaměřenou na charakterizaci léčiv pomocí hmotnostní spektrometrie s důrazem na techniky využívané v jejich prostorovém zobrazování. Diskutujte rovněž význam studovaných léčiv a jejich vliv na koncentrační složení endogenních sloučenin.
2. Zoptimalizujte UHPLC/MS/MS metodiku pro separaci a identifikaci vybraných léčiv a jejich metabolitů. Stanovte obsah léčiva v tkáních a tělních tekutinách.
3. Vypracujte protokol pro MALDI-MS zobrazování daných léčiv a jejich metabolitů zahrnující přípravu vzorku tkáně (řezání, selekce vhodné matrice a její uniformní depozice na povrch tkáně) a optimalizaci MS analýzy.
4. Vyhodnoťte výsledky získané z UHPLC/MS/MS analýzy a MALDI-MS zobrazování biotransformačních vzorků a navzájem je porovnejte. Výsledky rovněž porovnejte s literaturou a kriticky zhodnoťte.
Zásady pro vypracování
1. Vypracujte literární rešerši zaměřenou na charakterizaci léčiv pomocí hmotnostní spektrometrie s důrazem na techniky využívané v jejich prostorovém zobrazování. Diskutujte rovněž význam studovaných léčiv a jejich vliv na koncentrační složení endogenních sloučenin.
2. Zoptimalizujte UHPLC/MS/MS metodiku pro separaci a identifikaci vybraných léčiv a jejich metabolitů. Stanovte obsah léčiva v tkáních a tělních tekutinách.
3. Vypracujte protokol pro MALDI-MS zobrazování daných léčiv a jejich metabolitů zahrnující přípravu vzorku tkáně (řezání, selekce vhodné matrice a její uniformní depozice na povrch tkáně) a optimalizaci MS analýzy.
4. Vyhodnoťte výsledky získané z UHPLC/MS/MS analýzy a MALDI-MS zobrazování biotransformačních vzorků a navzájem je porovnejte. Výsledky rovněž porovnejte s literaturou a kriticky zhodnoťte.
Seznam doporučené literatury
Podle pokynů vedoucího práce.
Seznam doporučené literatury
Podle pokynů vedoucího práce.
Přílohy volně vložené
-
Přílohy vázané v práci
-
Převzato z knihovny
Ne
Plný text práce
Přílohy
Posudek(y) oponenta
Hodnocení vedoucího
Záznam průběhu obhajoby
Student seznámil členy zkušební komise s obsahem své diplomové práce a zodpověděl položené dotazy.