Candida albicans a Pseudomonas aeruginosa patří mezi oportunistické patogeny, které mimo jiné způsobují řadu onemocnění u imunokompromitovaných pacientů. C. albicans je dimorfická houba, která je schopna reverzibilně měnit svou morfologickou formu z kvasinkové na vláknitou a zvyšovat tak svou patogenitu. Mimoto je schopná v lidském hostiteli interagovat s bakteriemi, např. s P. aeruginosa a ovlivňovat tak zdraví jedince. P. aeruginosa je gramnegativní bakterie, která bývá často spojována s infekcemi respiračního systému, nejčastěji u pacientů s cystickou fibrózou.
Tyto dva mikroorganismy spolu v kokultuře vzájemně komunikují na molekulární úrovni a ovlivňují tak své chování. V této práci se snažíme zjistit, zda kokultivace C. albicans a P. aeruginosa ovlivní senzitivitu C. albicans vůči azolovým antimykotikům.
Anotace v angličtině
Candida albicans and Pseudomonas aeruginosa belong to the oportunistic pathogens, which cause many diseases in immunocompromised pacients. C. albicans is the dimorpic yeast, which can reversibly change its morphological form (yeast hyphae pseudohyphae) and thus increase its pathogenity. Furthmore, in human hosts C. albicans is able to interact with bacteria, .e.g. with P. aeruginosa, and affect the health of individuals. P. aeruginosa is a common Gram-negative bacterium, which is often associated with infections of respiratory tract, most often in patients with cystic fibrosis.
In coculture these two microorganisms communicate at the molecular level and affect the behavior of each other. In this work we try to investigate, if cocultivation of C. albicans and P. aeruginosa affects the sensitivity of C. albicans to azole antimycotics.
Klíčová slova
Candida albicans, Pseudomonas aeruginosa, Quorum sensing system, antimykotika
Klíčová slova v angličtině
Candida albicans, Pseudomonas aeruginosa, Quorum sensing system, antimycotics
Rozsah průvodní práce
77
Jazyk
CZ
Anotace
Candida albicans a Pseudomonas aeruginosa patří mezi oportunistické patogeny, které mimo jiné způsobují řadu onemocnění u imunokompromitovaných pacientů. C. albicans je dimorfická houba, která je schopna reverzibilně měnit svou morfologickou formu z kvasinkové na vláknitou a zvyšovat tak svou patogenitu. Mimoto je schopná v lidském hostiteli interagovat s bakteriemi, např. s P. aeruginosa a ovlivňovat tak zdraví jedince. P. aeruginosa je gramnegativní bakterie, která bývá často spojována s infekcemi respiračního systému, nejčastěji u pacientů s cystickou fibrózou.
Tyto dva mikroorganismy spolu v kokultuře vzájemně komunikují na molekulární úrovni a ovlivňují tak své chování. V této práci se snažíme zjistit, zda kokultivace C. albicans a P. aeruginosa ovlivní senzitivitu C. albicans vůči azolovým antimykotikům.
Anotace v angličtině
Candida albicans and Pseudomonas aeruginosa belong to the oportunistic pathogens, which cause many diseases in immunocompromised pacients. C. albicans is the dimorpic yeast, which can reversibly change its morphological form (yeast hyphae pseudohyphae) and thus increase its pathogenity. Furthmore, in human hosts C. albicans is able to interact with bacteria, .e.g. with P. aeruginosa, and affect the health of individuals. P. aeruginosa is a common Gram-negative bacterium, which is often associated with infections of respiratory tract, most often in patients with cystic fibrosis.
In coculture these two microorganisms communicate at the molecular level and affect the behavior of each other. In this work we try to investigate, if cocultivation of C. albicans and P. aeruginosa affects the sensitivity of C. albicans to azole antimycotics.
Klíčová slova
Candida albicans, Pseudomonas aeruginosa, Quorum sensing system, antimykotika
Klíčová slova v angličtině
Candida albicans, Pseudomonas aeruginosa, Quorum sensing system, antimycotics
Zásady pro vypracování
Teoretická část:
Prostudujte literaturu o patogenních kvasinkách rodu Candida s důrazem na C. albicans, dále literaturu o bakterii Pseudomonas aeruginosa a o vzájemných interakcích C. albicans a P. aeruginosa. Popište současný stav této problematiky. Dále zpracujete rešerši na téma rezistence patogenních kvasinek vůči antimykotikům, s důrazem na molekulární mechanismy, které jsou za vznik rezistence zodpovědné.
Experimentální část:
Proveďte evoluční pokus zahrnující opakovanou kultivaci C. albicans v přítomnosti P. aeruginosa. Zjistěte, dojde-li u C. albicans v důsledku kokultivace s P. aeruginosa ke snížení citlivosti vůči flukonazolu, případně kolik pasáží je potřeba, aby u C. albicans došlo ke změnám na molekulární úrovni. Z C. albicans, která prošla kokultivací s P. aeruginosa, izolujte DNA i RNA. Izolujte DNA a RNA též z kontrolního kmene. U vybraných genů analyzujte i) výskyt bodových mutací; ii) změny exprese. Zhodnoťe, jak byla v daném experimentálním uspořádání kvasinka ovlivněna přítomností bakterie.
Zásady pro vypracování
Teoretická část:
Prostudujte literaturu o patogenních kvasinkách rodu Candida s důrazem na C. albicans, dále literaturu o bakterii Pseudomonas aeruginosa a o vzájemných interakcích C. albicans a P. aeruginosa. Popište současný stav této problematiky. Dále zpracujete rešerši na téma rezistence patogenních kvasinek vůči antimykotikům, s důrazem na molekulární mechanismy, které jsou za vznik rezistence zodpovědné.
Experimentální část:
Proveďte evoluční pokus zahrnující opakovanou kultivaci C. albicans v přítomnosti P. aeruginosa. Zjistěte, dojde-li u C. albicans v důsledku kokultivace s P. aeruginosa ke snížení citlivosti vůči flukonazolu, případně kolik pasáží je potřeba, aby u C. albicans došlo ke změnám na molekulární úrovni. Z C. albicans, která prošla kokultivací s P. aeruginosa, izolujte DNA i RNA. Izolujte DNA a RNA též z kontrolního kmene. U vybraných genů analyzujte i) výskyt bodových mutací; ii) změny exprese. Zhodnoťe, jak byla v daném experimentálním uspořádání kvasinka ovlivněna přítomností bakterie.
Seznam doporučené literatury
Hogan and Kolter (2002) Pseudomonas-Candida interactions: an ecological role for virulence factors.Science 296, 2229-2232.
Brand, Barnes, Mackenzie et al. (2008) Cell wall glycans and soluble factors determine the interactions between the hyphae of Candida albicans and Pseudomonas aeruginosa. FEMS Microbiol Lett 287, 48-55.
Tashiro et al. (2013) Interspecies interacitions between Pseudomonas aeruginosa and other microorganisms. Microbes and Environments 28, 13-24.
Schillig and Morschhauser (2013) Analysis of a fungus-specific transcription factor family, the Candida albicans zinc cluster proteins? Mol Microbiol 89, 1003-1017.
Seznam doporučené literatury
Hogan and Kolter (2002) Pseudomonas-Candida interactions: an ecological role for virulence factors.Science 296, 2229-2232.
Brand, Barnes, Mackenzie et al. (2008) Cell wall glycans and soluble factors determine the interactions between the hyphae of Candida albicans and Pseudomonas aeruginosa. FEMS Microbiol Lett 287, 48-55.
Tashiro et al. (2013) Interspecies interacitions between Pseudomonas aeruginosa and other microorganisms. Microbes and Environments 28, 13-24.
Schillig and Morschhauser (2013) Analysis of a fungus-specific transcription factor family, the Candida albicans zinc cluster proteins? Mol Microbiol 89, 1003-1017.
Přílohy volně vložené
-
Přílohy vázané v práci
ilustrace, grafy, tabulky
Převzato z knihovny
Ne
Plný text práce
Přílohy
Posudek(y) oponenta
Hodnocení vedoucího
Záznam průběhu obhajoby
Prezentace výsledků diplomové práce.
Diskuze k posudku vedoucího a oponenta diplomové práce. Studentka zodpověděla všechny dotazy a připomínky k diplomové práci.