Tato diplomová práce je zaměřena na optimalizaci elektroforetické separace oligosacharidů s cílem dosáhnout sub-minutové doby analýzy. V rámci měření byly testovány vlivy délky a vnitřního průměru separační kapiláry, složení základního elektrolytu, separačních podmínek (vložené napětí, teplota) a vlivy přídavku organických rozpouštědel. Oligosacharidy byly derivatizovány reduktivní aminací s činidlem 8-aminonaftalen-1,3,6-trisulfonovou kyselinou. Uvedené postupy jsou rešeršně popsány v teoretické části této diplomové práce. V experimentální části byly nalezeny podmínky poskytující optimální analýzu oligosacharidů v organickém pufru. Zjištěné výsledky jsou porovnány a diskutovány s ohledem na co nejkratší dobu separace a předpoklad chování po převedení do mikročipového formátu.
Anotace v angličtině
This diploma thesis is focused on optimization of electrophoretic separation of oligosaccharides in sub-minute analysis time range. The effects of length and internal diameter of separation capillary, composition of background electrolyte, separation conditions (applied voltage, temperature) and addition of organic solvents were evaluated. Oligosaccharides were derivatized using reductive amination with 8-aminonaphthalene-1,3,6-trisulfonic acid. Aforementioned procedures are described in the theoretical part. In the experimental part, conditions providing optimal analysis of oligosaccharides in an organic buffer were found. The results are compared and discussed with respect to the shortest analysis time and transfer to the microchip format.
Capillary zone electrophoresis, optimization of separation, oligosaccharides, peak capacity, microchip
Rozsah průvodní práce
-
Jazyk
CZ
Anotace
Tato diplomová práce je zaměřena na optimalizaci elektroforetické separace oligosacharidů s cílem dosáhnout sub-minutové doby analýzy. V rámci měření byly testovány vlivy délky a vnitřního průměru separační kapiláry, složení základního elektrolytu, separačních podmínek (vložené napětí, teplota) a vlivy přídavku organických rozpouštědel. Oligosacharidy byly derivatizovány reduktivní aminací s činidlem 8-aminonaftalen-1,3,6-trisulfonovou kyselinou. Uvedené postupy jsou rešeršně popsány v teoretické části této diplomové práce. V experimentální části byly nalezeny podmínky poskytující optimální analýzu oligosacharidů v organickém pufru. Zjištěné výsledky jsou porovnány a diskutovány s ohledem na co nejkratší dobu separace a předpoklad chování po převedení do mikročipového formátu.
Anotace v angličtině
This diploma thesis is focused on optimization of electrophoretic separation of oligosaccharides in sub-minute analysis time range. The effects of length and internal diameter of separation capillary, composition of background electrolyte, separation conditions (applied voltage, temperature) and addition of organic solvents were evaluated. Oligosaccharides were derivatized using reductive amination with 8-aminonaphthalene-1,3,6-trisulfonic acid. Aforementioned procedures are described in the theoretical part. In the experimental part, conditions providing optimal analysis of oligosaccharides in an organic buffer were found. The results are compared and discussed with respect to the shortest analysis time and transfer to the microchip format.
Capillary zone electrophoresis, optimization of separation, oligosaccharides, peak capacity, microchip
Zásady pro vypracování
1. V dostupné vědecké literatuře vyhledejte a rešeršně zpracujte práce týkající se rychlých analýz pomocí kapilární elektroforézy. Popište vlivy jednotlivých experimentálních parametrů na separace.
2. Připravte deriváty vybraných oligosacharidů s vyžitím reduktivní aminace. Optimalizujte separaci derivatizovaných oligosacharidů s cílem dosáhnout sub-minutové doby analýzy. Experimentálně prověřte vlivy matrice vzorku na separaci, zejména přítomnost organických rozpouštědel (acetonitril, methanol).
3. Optimalizovaný postup přeneste do mikročipového formátu. Porovnejte výhody a nevýhody tohoto uspořádání.
4. Získané výsledky kriticky zhodnoťte a diskutujte.
Zásady pro vypracování
1. V dostupné vědecké literatuře vyhledejte a rešeršně zpracujte práce týkající se rychlých analýz pomocí kapilární elektroforézy. Popište vlivy jednotlivých experimentálních parametrů na separace.
2. Připravte deriváty vybraných oligosacharidů s vyžitím reduktivní aminace. Optimalizujte separaci derivatizovaných oligosacharidů s cílem dosáhnout sub-minutové doby analýzy. Experimentálně prověřte vlivy matrice vzorku na separaci, zejména přítomnost organických rozpouštědel (acetonitril, methanol).
3. Optimalizovaný postup přeneste do mikročipového formátu. Porovnejte výhody a nevýhody tohoto uspořádání.
4. Získané výsledky kriticky zhodnoťte a diskutujte.
Seznam doporučené literatury
Podle pokynů vedoucího práce.
Seznam doporučené literatury
Podle pokynů vedoucího práce.
Přílohy volně vložené
-
Přílohy vázané v práci
-
Převzato z knihovny
Ne
Plný text práce
Přílohy
Posudek(y) oponenta
Hodnocení vedoucího
Záznam průběhu obhajoby
Studentka seznámila členy zkušební komise s obsahem své diplomové práce, byla seznámena s posudkem vedoucího a oponenta diplomové práce. Studentka poté odpověděla na otázky položené členy zkušební komise.