Butyrylcholinesterasa je enzym tvořený v játrech patřící do skupiny cholinesteras. Butyrylcholinesterasa nemá v organismu fyziologický substrát a její doposud neznámý význam v organismu je předmětem výzkumu. Stanovení aktivity tohoto enzymu se nejčastěji provádí pomocí Ellmanovy metody. Butyrylcholinesterasa je považována za ideální rozpoznávací prvek přírodního původu a v kombinaci s fyzikální senzorickou částí je využívána pro přípravu biosenzorů. Cílem diplomové práce byla konstrukce biosenzoru a následné ověření jeho funkcí.
Anotace v angličtině
Butyrylcholinesterase belonging to cholinesterase is the enzyme formed in the liver. Butyrylcholinesterase does not have physiological substrate in the organism and its uncertain significance is the subject of scientific research. The assessment of enzyme activity is most often carried out with Ellman's method. Butyrylcholinesterase is considered as appropriate recognition element of natural origin and in the combination with physical sensory part is used for the preparation of biosensors. The purpose of the thesis was construction a biosensor and subsequent verification of its functions.
Butyrylcholinesterasa je enzym tvořený v játrech patřící do skupiny cholinesteras. Butyrylcholinesterasa nemá v organismu fyziologický substrát a její doposud neznámý význam v organismu je předmětem výzkumu. Stanovení aktivity tohoto enzymu se nejčastěji provádí pomocí Ellmanovy metody. Butyrylcholinesterasa je považována za ideální rozpoznávací prvek přírodního původu a v kombinaci s fyzikální senzorickou částí je využívána pro přípravu biosenzorů. Cílem diplomové práce byla konstrukce biosenzoru a následné ověření jeho funkcí.
Anotace v angličtině
Butyrylcholinesterase belonging to cholinesterase is the enzyme formed in the liver. Butyrylcholinesterase does not have physiological substrate in the organism and its uncertain significance is the subject of scientific research. The assessment of enzyme activity is most often carried out with Ellman's method. Butyrylcholinesterase is considered as appropriate recognition element of natural origin and in the combination with physical sensory part is used for the preparation of biosensors. The purpose of the thesis was construction a biosensor and subsequent verification of its functions.
Teoretická část:
1. Vypracovat literární rešerši týkající se butyrylcholinesterasy a acetylcholinesterasy, popsat jejich význam v organismu a oba enzymy porovnat.
2. Popsat metody stanovení aktivity cholinesteras s důrazem na butyrylcholinesterasu a možnosti využití těchto metod ke stanovení aktivity enzymů a pro studium inhibitorů cholinesteras.
3. Popsat biosenzory a detektory založené na cholinesterasách a možnosti jejich využití v praxi.
Experimentální část:
1. Provést výběr substrátů vhodných pro stanovení aktivity butyrylcholinesterasy.
2. Vybrat metody ke stanovení aktivity butyrylcholinesterasy, osvojit si zásady pro manipulaci s enzymem a provést stabilizaci.
3. Vypočítat kinetické parametry pro vybrané substráty.
4. Připravit analyzátor a ověřit jeho funkce pro vybrané látky (např. karbofuran, pyridostigmin atd.).
5. Zhodnotit a porovnat dosažené výsledky.
Zásady pro vypracování
Teoretická část:
1. Vypracovat literární rešerši týkající se butyrylcholinesterasy a acetylcholinesterasy, popsat jejich význam v organismu a oba enzymy porovnat.
2. Popsat metody stanovení aktivity cholinesteras s důrazem na butyrylcholinesterasu a možnosti využití těchto metod ke stanovení aktivity enzymů a pro studium inhibitorů cholinesteras.
3. Popsat biosenzory a detektory založené na cholinesterasách a možnosti jejich využití v praxi.
Experimentální část:
1. Provést výběr substrátů vhodných pro stanovení aktivity butyrylcholinesterasy.
2. Vybrat metody ke stanovení aktivity butyrylcholinesterasy, osvojit si zásady pro manipulaci s enzymem a provést stabilizaci.
3. Vypočítat kinetické parametry pro vybrané substráty.
4. Připravit analyzátor a ověřit jeho funkce pro vybrané látky (např. karbofuran, pyridostigmin atd.).
5. Zhodnotit a porovnat dosažené výsledky.
Seznam doporučené literatury
Podle pokynů vedoucího diplomové práce.
Seznam doporučené literatury
Podle pokynů vedoucího diplomové práce.
Přílohy volně vložené
-
Přílohy vázané v práci
ilustrace, tabulky
Převzato z knihovny
Ne
Plný text práce
Přílohy
Posudek(y) oponenta
Hodnocení vedoucího
Záznam průběhu obhajoby
1. Prezentace výsledků diplomové práce.
2. Diskuze k posudku vedoucího diplomové práce.
3. Studentka zodpověděla všechny dotazy a připomínky k DP.