Diplomová práce se zabývá zavedením metody pro fosforylaci peptidů a proteinů pomocí solubilních a imobilizovaných kináz. Vybranými kinázami pro fosforylaci byla proteinkináza A a glykogen syntáza kináza-3. V rámci práce byla vybrána a optimalizována metoda pro průkaz a kontrolu účinnosti fosforylace peptidů a proteinů.
Anotace v angličtině
This thesis deals with the implementation of method for phosphorylation of peptides and proteins by soluble and immobilized kinases. The selected kinases for phosphorylation were proteinkinase A and glycogen synthase kinase-3. This thesis include selection and optimalization of method for detection and controlling effectiveness of phosphorylation of peptides and proteins.
Klíčová slova
fosforylace, kinázy, fosfoproteiny, proteinkináza A, glykogen syntáza kináza-3
Klíčová slova v angličtině
Phosphorylation of recombinant proteins by soluble and immobilized kinases
Rozsah průvodní práce
-
Jazyk
CZ
Anotace
Diplomová práce se zabývá zavedením metody pro fosforylaci peptidů a proteinů pomocí solubilních a imobilizovaných kináz. Vybranými kinázami pro fosforylaci byla proteinkináza A a glykogen syntáza kináza-3. V rámci práce byla vybrána a optimalizována metoda pro průkaz a kontrolu účinnosti fosforylace peptidů a proteinů.
Anotace v angličtině
This thesis deals with the implementation of method for phosphorylation of peptides and proteins by soluble and immobilized kinases. The selected kinases for phosphorylation were proteinkinase A and glycogen synthase kinase-3. This thesis include selection and optimalization of method for detection and controlling effectiveness of phosphorylation of peptides and proteins.
Klíčová slova
fosforylace, kinázy, fosfoproteiny, proteinkináza A, glykogen syntáza kináza-3
Klíčová slova v angličtině
Phosphorylation of recombinant proteins by soluble and immobilized kinases
Zásady pro vypracování
Teoretická část:
" Fosforylace proteinů - funkce, význam in vivo, popis enzymové reakce.
" Využití metod pro detekci fosforylací - celková fosforylace, specifické fosforylační místa.
" Enzymy podílející se na fosforylaci - kinázy, fosfatázy.
" Přehled kináz významných při fosforylace diagnosticky a terapeuticky významných proteinů. Charakterizace kináz pro in vitro aplikace.
" Význam tau proteinu a myelinového bazického proteinu a jejich fosforylovaných forem u neurodegenerativních chorob.
Experimentální část:
" Imobilizace enzymů/proteinů na magnetické částice.
" Stanovení aktivity solubilní a vázané formy vybraných kináz.
" Fosforylace nízkomolekulárních substrátů a vybraných proteinů pomocí imobilizovaných kináz.
" Průkaz fosforylace analytů pomocí elektroforetických metod a pomocí hmotnostní spektrometrie.
Zásady pro vypracování
Teoretická část:
" Fosforylace proteinů - funkce, význam in vivo, popis enzymové reakce.
" Využití metod pro detekci fosforylací - celková fosforylace, specifické fosforylační místa.
" Enzymy podílející se na fosforylaci - kinázy, fosfatázy.
" Přehled kináz významných při fosforylace diagnosticky a terapeuticky významných proteinů. Charakterizace kináz pro in vitro aplikace.
" Význam tau proteinu a myelinového bazického proteinu a jejich fosforylovaných forem u neurodegenerativních chorob.
Experimentální část:
" Imobilizace enzymů/proteinů na magnetické částice.
" Stanovení aktivity solubilní a vázané formy vybraných kináz.
" Fosforylace nízkomolekulárních substrátů a vybraných proteinů pomocí imobilizovaných kináz.
" Průkaz fosforylace analytů pomocí elektroforetických metod a pomocí hmotnostní spektrometrie.
Seznam doporučené literatury
Podle pokynů vedoucího diplomové práce.
Seznam doporučené literatury
Podle pokynů vedoucího diplomové práce.
Přílohy volně vložené
-
Přílohy vázané v práci
-
Převzato z knihovny
Ne
Plný text práce
Přílohy
Odůvodnění nezveřejnění VŠKP
Posudek(y) oponenta
Hodnocení vedoucího
Záznam průběhu obhajoby
1. Prezentace výsledků diplomové práce.\par
2. Diskuze k posudku vedoucího a oponenta diplomové práce\par
3. Studentka zodpověděla všechny dotazy a připomínky k DP.\par