Diplomová práce se zabývá testováním nově vyvíjeného zařízení pro porovnání vlastností protilátek s cílem vybrat mezi produkty dostupnými na trhu tu s nejvyšší specifitou a afinitou k danému antigenu. Jako modelový systém antigenu a protilátky byl použit chymotrypsin a anti-chymotrypsinové prasečí sérum, pro který byl nejprve vyvinut protokol pro klasický dotblot. Získaný protokol se následně použil u testovaného zařízení, které také pracuje na principu dotblotu. Při dalších experimentech se již přistoupilo k jiným systémům antigen protilátka a porovnávaly se vlastnosti protilátek určené pro konkrétní aplikace.
Anotace v angličtině
The thesis deals with testing of the newly developed device for comparison of antibody properties with the aim to select the antibody with the highest specifity and affinity to the desired antigen between available products on the market. As a model system of antigen and antibody, the chymotrypsin and the anti-chymotrypsin swine serum were selected and thus the classic dotblot protocol was developed first. The final protocol was applied on the tested device that works also on dotblot principle. In further experiments, comparation properties of antibodies for specific applications on other antibody-antigen system was performed.
Klíčová slova
dotblot, afinitní dotblot, protilátka, ELISA, antigen, chymotrypsin, bakterie, protein
Klíčová slova v angličtině
dotblot, affinity dotblot, antibody, ELISA, antigen, chymotrypsin, bacteria, protein
Rozsah průvodní práce
118
Jazyk
CZ
Anotace
Diplomová práce se zabývá testováním nově vyvíjeného zařízení pro porovnání vlastností protilátek s cílem vybrat mezi produkty dostupnými na trhu tu s nejvyšší specifitou a afinitou k danému antigenu. Jako modelový systém antigenu a protilátky byl použit chymotrypsin a anti-chymotrypsinové prasečí sérum, pro který byl nejprve vyvinut protokol pro klasický dotblot. Získaný protokol se následně použil u testovaného zařízení, které také pracuje na principu dotblotu. Při dalších experimentech se již přistoupilo k jiným systémům antigen protilátka a porovnávaly se vlastnosti protilátek určené pro konkrétní aplikace.
Anotace v angličtině
The thesis deals with testing of the newly developed device for comparison of antibody properties with the aim to select the antibody with the highest specifity and affinity to the desired antigen between available products on the market. As a model system of antigen and antibody, the chymotrypsin and the anti-chymotrypsin swine serum were selected and thus the classic dotblot protocol was developed first. The final protocol was applied on the tested device that works also on dotblot principle. In further experiments, comparation properties of antibodies for specific applications on other antibody-antigen system was performed.
Klíčová slova
dotblot, afinitní dotblot, protilátka, ELISA, antigen, chymotrypsin, bakterie, protein
Klíčová slova v angličtině
dotblot, affinity dotblot, antibody, ELISA, antigen, chymotrypsin, bacteria, protein
Zásady pro vypracování
1. Teoretická část:
a) Protilátky (monoklonální vs. polyklonální, jejich struktura, techniky jejich přípravy/výroby)
b) ELISA (základní definice metody, princip stanovení, využití)
c) Blotovací techniky (princip, typy a rozdělení, se zaměřením na dotblot).
d) Současné využití dotblotu ve výzkumu (rešerše za posledních 5 let)
2. Praktická část:
a) Dotblot: Osvojení techniky, optimalizace protokolu na systému chymotrypsin - antichymotrypsinové prasečí sérum.
b) Afinitní dotblot (optimalizace koncentrací chaotropního činidla)
c) ELISA: konfirmační metoda pro stanovení avidity prasečího a beraního antichymotrypsinového séra
d) Zopakování dosažených výsledků na vyvíjeném mikrodotblotu
e) Aplikace protokolu na jiné systémy antigen-protilátka
Zásady pro vypracování
1. Teoretická část:
a) Protilátky (monoklonální vs. polyklonální, jejich struktura, techniky jejich přípravy/výroby)
b) ELISA (základní definice metody, princip stanovení, využití)
c) Blotovací techniky (princip, typy a rozdělení, se zaměřením na dotblot).
d) Současné využití dotblotu ve výzkumu (rešerše za posledních 5 let)
2. Praktická část:
a) Dotblot: Osvojení techniky, optimalizace protokolu na systému chymotrypsin - antichymotrypsinové prasečí sérum.
b) Afinitní dotblot (optimalizace koncentrací chaotropního činidla)
c) ELISA: konfirmační metoda pro stanovení avidity prasečího a beraního antichymotrypsinového séra
d) Zopakování dosažených výsledků na vyvíjeném mikrodotblotu
e) Aplikace protokolu na jiné systémy antigen-protilátka
Seznam doporučené literatury
Podle pokynů vedoucího diplomové práce.
Seznam doporučené literatury
Podle pokynů vedoucího diplomové práce.
Přílohy volně vložené
-
Přílohy vázané v práci
-
Převzato z knihovny
Ne
Plný text práce
Přílohy
Odůvodnění nezveřejnění VŠKP
Posudek(y) oponenta
Hodnocení vedoucího
Záznam průběhu obhajoby
1. Prezentace výsledků diplomové práce.\par
2. Diskuze k posudku vedoucího a oponenta diplomové práce.\par
3. Studentka zodpověděla všechny dotazy a připomínky k DP.\par