Diplomová práce se zabývá přípravou a charakterizací magnetického nosiče s imobilizovanou Src kinázou. Solubilní i imobilizovaná forma Src kinázy byla použita k in vitro fosforylaci hovězího myelinového bazického proteinu a rekombinantního proteinu Tau-441. Úspěšnost fosforylace byla hodnocena metodou Western blot, dále pomocí dendrimeru pIMAGO a metodou MALDI-Orbitrap hmotnostní spektrometrie.
Anotace v angličtině
The thesis deals with the preparation and characterization of magnetic carrier with immobilized Src kinase. Both soluble and immobilized Src kinase was used to in vitro phosphorylation bovine myelin basic protein and recombinant protein Tau-441. The success of phosphorylation was assessed by Western blotting, pIMAGO dendrimer and MALDI-Orbitrap mass spectrometry.
Immobilized Src kinase, phosphorylation, magnetic carrier, myelin basic protein, Tau-441, pIMAGO dendrimer, mass spectrometry
Rozsah průvodní práce
127 s.
Jazyk
CZ
Anotace
Diplomová práce se zabývá přípravou a charakterizací magnetického nosiče s imobilizovanou Src kinázou. Solubilní i imobilizovaná forma Src kinázy byla použita k in vitro fosforylaci hovězího myelinového bazického proteinu a rekombinantního proteinu Tau-441. Úspěšnost fosforylace byla hodnocena metodou Western blot, dále pomocí dendrimeru pIMAGO a metodou MALDI-Orbitrap hmotnostní spektrometrie.
Anotace v angličtině
The thesis deals with the preparation and characterization of magnetic carrier with immobilized Src kinase. Both soluble and immobilized Src kinase was used to in vitro phosphorylation bovine myelin basic protein and recombinant protein Tau-441. The success of phosphorylation was assessed by Western blotting, pIMAGO dendrimer and MALDI-Orbitrap mass spectrometry.
Immobilized Src kinase, phosphorylation, magnetic carrier, myelin basic protein, Tau-441, pIMAGO dendrimer, mass spectrometry
Zásady pro vypracování
Teoretická část:
Src kináza, její zařazení do skupiny tyrosin kináz, úloha v organismu.
Přehled metod ukotvení enzymů a kináz k pevným nosičům s diskusí o ovlivnění biologické aktivity.
Fosforylace nízkomolekulárních a vysokomolekulárních substrátů in vitro.
Experimentální část:
Vazba enzymů (kináz) na superparamagnetické částice, fosforylace peptidových substrátů. Stabilita připravených imobilizovaných enzymů.
Detekce efektivity vazby pomocí enzymových substrátů a analytických metod jako hmotnostní spektrometrie, elektroforetické metody, protein-specifické metody, blotting.
Fosforylace myelinového bazického proteinu anebo rek. Tau proteinu, detekce úspěšnosti fosforylace.
Zásady pro vypracování
Teoretická část:
Src kináza, její zařazení do skupiny tyrosin kináz, úloha v organismu.
Přehled metod ukotvení enzymů a kináz k pevným nosičům s diskusí o ovlivnění biologické aktivity.
Fosforylace nízkomolekulárních a vysokomolekulárních substrátů in vitro.
Experimentální část:
Vazba enzymů (kináz) na superparamagnetické částice, fosforylace peptidových substrátů. Stabilita připravených imobilizovaných enzymů.
Detekce efektivity vazby pomocí enzymových substrátů a analytických metod jako hmotnostní spektrometrie, elektroforetické metody, protein-specifické metody, blotting.
Fosforylace myelinového bazického proteinu anebo rek. Tau proteinu, detekce úspěšnosti fosforylace.
Seznam doporučené literatury
-
Seznam doporučené literatury
-
Přílohy volně vložené
-
Přílohy vázané v práci
ilustrace, grafy, schémata, tabulky
Převzato z knihovny
Ne
Plný text práce
Přílohy
Posudek(y) oponenta
Hodnocení vedoucího
Záznam průběhu obhajoby
1. Prezentace výsledků diplomové práce.
2. Diskuze k posudku vedoucího a oponenta diplomové práce.
3. Studentka zodpověděla všechny dotazy a připomínky k diplomové práci.