Tato diplomová práce s názvem Optimalizace kultivačních podmínek pro zvýšení mitochondriální respirace ve své teoretické části shrnuje základní informace o mitochondriích, včetně jejich struktury a funkce. Dále popisuje jednotlivé parametry mitochondriální bioenergetiky. Část této práce je také věnována metabolismu nádorových buněk, Crabtree efektu a zásadám kultivace buněk in vitro. V této práci je také zahrnuta podkapitola o mastných kyselinách s krátkým řetězcem (SCFA, Short Chain Fatty Acid), jejichž účinek na metabolismus nádorových buněčných linií HepG2 a A549 byl testován na analyzátoru Seahorse XFe96. Výsledky ukázaly vliv SCFA na metabolismus použitých buněčných linií hlavně při dlouhodobé expozici, akutní expozice SCFA nezpůsobila signifikantní změny.
Anotace v angličtině
Theoretical part of this theses entitled Optimalization of culture conditions to increase mitochondrial respiration summarizes basic information about mitochondrial structure and energy production process. It also describes the different parameters of mitochondrial bioenergetic profile. Part of this work is devoted to the metabolism of tumor cells, the Crabtree effect and the principles of cell culture in vitro. This thesis includes a subchapter about short-chain fatty acids (SCFA) and their influence on the metabolism of tumor cell lines HepG2 and A549, which was tested with Seahorse XFe96 analyser. The results showed a significant changes of cell lines metabolism after long exposure to SCFA. Acute exposure did not cause significant changes in cellular metabolism.
Klíčová slova
Bioenergetický profil, mastné kyseliny s krátkým řetězcem, mitochondrie, HepG2, A549, nádorový metabolismus.
Klíčová slova v angličtině
Bioenergetic profile, short chain fatty acids, mitochondria, HepG2, A549, cancer metabolism
Rozsah průvodní práce
70
Jazyk
CZ
Anotace
Tato diplomová práce s názvem Optimalizace kultivačních podmínek pro zvýšení mitochondriální respirace ve své teoretické části shrnuje základní informace o mitochondriích, včetně jejich struktury a funkce. Dále popisuje jednotlivé parametry mitochondriální bioenergetiky. Část této práce je také věnována metabolismu nádorových buněk, Crabtree efektu a zásadám kultivace buněk in vitro. V této práci je také zahrnuta podkapitola o mastných kyselinách s krátkým řetězcem (SCFA, Short Chain Fatty Acid), jejichž účinek na metabolismus nádorových buněčných linií HepG2 a A549 byl testován na analyzátoru Seahorse XFe96. Výsledky ukázaly vliv SCFA na metabolismus použitých buněčných linií hlavně při dlouhodobé expozici, akutní expozice SCFA nezpůsobila signifikantní změny.
Anotace v angličtině
Theoretical part of this theses entitled Optimalization of culture conditions to increase mitochondrial respiration summarizes basic information about mitochondrial structure and energy production process. It also describes the different parameters of mitochondrial bioenergetic profile. Part of this work is devoted to the metabolism of tumor cells, the Crabtree effect and the principles of cell culture in vitro. This thesis includes a subchapter about short-chain fatty acids (SCFA) and their influence on the metabolism of tumor cell lines HepG2 and A549, which was tested with Seahorse XFe96 analyser. The results showed a significant changes of cell lines metabolism after long exposure to SCFA. Acute exposure did not cause significant changes in cellular metabolism.
Klíčová slova
Bioenergetický profil, mastné kyseliny s krátkým řetězcem, mitochondrie, HepG2, A549, nádorový metabolismus.
Klíčová slova v angličtině
Bioenergetic profile, short chain fatty acids, mitochondria, HepG2, A549, cancer metabolism
Zásady pro vypracování
Teoretická část:
mitochondriální bioenergetika a metabolismus hlavních mitochondriálních substrátů, zejména Krebsova cyklu a dýchacího řetězce,
zásady kultivace buněk a tkání in vitro,
přehled předchozích pokusů pro ovlivnění oxidativní fosforylace a Crabtreeova efektu.
Experimentální část:
kultivace nádorových buněk (linie A549, HepG2, atd.) v různých podmínkách a příprava vzorků pro další analýzy,
popis růstu buněk a aktivity podle fenotypů,
srovnání bioenergetických profilů různých buněk,
izolace mitochondrií zajímavých fenotypů pro analýzu oxygrafem Oroboros.
Zásady pro vypracování
Teoretická část:
mitochondriální bioenergetika a metabolismus hlavních mitochondriálních substrátů, zejména Krebsova cyklu a dýchacího řetězce,
zásady kultivace buněk a tkání in vitro,
přehled předchozích pokusů pro ovlivnění oxidativní fosforylace a Crabtreeova efektu.
Experimentální část:
kultivace nádorových buněk (linie A549, HepG2, atd.) v různých podmínkách a příprava vzorků pro další analýzy,
popis růstu buněk a aktivity podle fenotypů,
srovnání bioenergetických profilů různých buněk,
izolace mitochondrií zajímavých fenotypů pro analýzu oxygrafem Oroboros.
Seznam doporučené literatury
-
Seznam doporučené literatury
-
Přílohy volně vložené
-
Přílohy vázané v práci
ilustrace, grafy, tabulky
Převzato z knihovny
Ne
Plný text práce
Přílohy
Posudek(y) oponenta
Hodnocení vedoucího
Záznam průběhu obhajoby
1. Prezentace výsledků diplomové práce.
2. Diskuze k posudkům vedoucího a oponenta diplomové práce.
3. Studentka zodpověděla všechny dotazy a připomínky k DP.