Diplomová práce se v teoretické části zabývá obecným popisem netopýrů s konkrétním zaměřením na netopýry žijící v podnebí mírného pásu, jejich reprodukci a pohlavní hormon progesteron u samiček. Druhá polovina teoretické části je zaměřena na způsoby odběru vzorků, popis obecných principů vhodných metod a technik pro analýzu progesteronu v tělních tekutinách. Praktická část je věnována konkrétní práci v laboratoři. Zaměřuje se na získání vzorků moči netopýrů a následné měření pomocí vhodné metody s ohledem na finanční i časovou náročnost. Dále je popsán celý postup analýzy progesteronu včetně zkoumání vhodného absorpčního materiálu pro moč, výběru vhodného rozpouštědla, doby extrakce a teploty odparu. Na základě provedených testů a zkoumání bylo vyhodnoceno za nejvhodnější využití pro absorpci papír značky Whatman, dále rozpouštědlo hexan v ethylacetátu (3:2) za laboratorní teploty a doba extrakce 3 hodiny. Za těchto podmínek je stanovená účinnost extrakce a proměřen reálný vzorek se směsí moči a jiných tělních tekutin netopýra po porodu. Koncentrace progesteronu je stanovena imunoanalytickou metodou ELISA. Na závěr je zvolený způsob analýzy progesteronu z moči netopýrů diskutován a na základě prvotních výsledků jsou navržena vylepšení celého přístupu k analýze moči netopýrů.
Anotace v angličtině
In the theoretical part, the thesis deals with a general description of bats with a specific focus on bats living in our climate, their reproduction, and the female sex hormone progesterone. The second half of the theoretical part is focused on sample collection methods, a description of general principles, suitable methods, and techniques for the analysis of progesterone in body fluids. The practical part is dedicated to specific work in the laboratory. It focuses on choosing the right solution for obtaining bat urine samples and subsequent measurements using appropriate methods with regard to financial and time requirements. Next, the entire procedure of progesterone analysis is described, including the investigation of a suitable absorbent material for urine, the selection of a suitable solvent, the extraction time, and the temperature of the evaporator. Based on tests performed and options explored the most suitable absorbent material is rated Whatman filter paper, solvent hexane in ethylacetate (3:2) at room temperature, and the extraction time of 3 hours. Under these conditions, the extraction efficiency and the actual sample with a mixture of urine and other body fluids of the after-labor bat are measured. Progesterone concentration is determined by the immunoanalytical ELISA method. In the end, the chosen method of progesterone analysis from bat urine is discussed and the conclusion of the whole approach to the analysis of bat urine is proposed.
Klíčová slova
Moč netopýrů, progesteron, extrakce progesteronu, imunoanalýza, ELISA
Klíčová slova v angličtině
Bat urine, progesterone, progesterone extraction, immunoassay, ELISA
Rozsah průvodní práce
68 s.
Jazyk
CZ
Anotace
Diplomová práce se v teoretické části zabývá obecným popisem netopýrů s konkrétním zaměřením na netopýry žijící v podnebí mírného pásu, jejich reprodukci a pohlavní hormon progesteron u samiček. Druhá polovina teoretické části je zaměřena na způsoby odběru vzorků, popis obecných principů vhodných metod a technik pro analýzu progesteronu v tělních tekutinách. Praktická část je věnována konkrétní práci v laboratoři. Zaměřuje se na získání vzorků moči netopýrů a následné měření pomocí vhodné metody s ohledem na finanční i časovou náročnost. Dále je popsán celý postup analýzy progesteronu včetně zkoumání vhodného absorpčního materiálu pro moč, výběru vhodného rozpouštědla, doby extrakce a teploty odparu. Na základě provedených testů a zkoumání bylo vyhodnoceno za nejvhodnější využití pro absorpci papír značky Whatman, dále rozpouštědlo hexan v ethylacetátu (3:2) za laboratorní teploty a doba extrakce 3 hodiny. Za těchto podmínek je stanovená účinnost extrakce a proměřen reálný vzorek se směsí moči a jiných tělních tekutin netopýra po porodu. Koncentrace progesteronu je stanovena imunoanalytickou metodou ELISA. Na závěr je zvolený způsob analýzy progesteronu z moči netopýrů diskutován a na základě prvotních výsledků jsou navržena vylepšení celého přístupu k analýze moči netopýrů.
Anotace v angličtině
In the theoretical part, the thesis deals with a general description of bats with a specific focus on bats living in our climate, their reproduction, and the female sex hormone progesterone. The second half of the theoretical part is focused on sample collection methods, a description of general principles, suitable methods, and techniques for the analysis of progesterone in body fluids. The practical part is dedicated to specific work in the laboratory. It focuses on choosing the right solution for obtaining bat urine samples and subsequent measurements using appropriate methods with regard to financial and time requirements. Next, the entire procedure of progesterone analysis is described, including the investigation of a suitable absorbent material for urine, the selection of a suitable solvent, the extraction time, and the temperature of the evaporator. Based on tests performed and options explored the most suitable absorbent material is rated Whatman filter paper, solvent hexane in ethylacetate (3:2) at room temperature, and the extraction time of 3 hours. Under these conditions, the extraction efficiency and the actual sample with a mixture of urine and other body fluids of the after-labor bat are measured. Progesterone concentration is determined by the immunoanalytical ELISA method. In the end, the chosen method of progesterone analysis from bat urine is discussed and the conclusion of the whole approach to the analysis of bat urine is proposed.
Klíčová slova
Moč netopýrů, progesteron, extrakce progesteronu, imunoanalýza, ELISA
Klíčová slova v angličtině
Bat urine, progesterone, progesterone extraction, immunoassay, ELISA
Zásady pro vypracování
1. V teoretické části vyhledejte a rešeršně zpracujte možnosti analýzy progesteronu různými technikami v moči a dalších tělních tekutinách netopýrů, respektive dalších živočichů.
2. V experimentální části navrhněte a ověřte vhodný postup zpracování vzorku moči netopýrů a následnou analýzu obsahu progesteronu.
3. Dosažené výsledky zhodnoťte a kriticky diskutujte
Zásady pro vypracování
1. V teoretické části vyhledejte a rešeršně zpracujte možnosti analýzy progesteronu různými technikami v moči a dalších tělních tekutinách netopýrů, respektive dalších živočichů.
2. V experimentální části navrhněte a ověřte vhodný postup zpracování vzorku moči netopýrů a následnou analýzu obsahu progesteronu.
3. Dosažené výsledky zhodnoťte a kriticky diskutujte
Seznam doporučené literatury
Podle pokynů vedoucího práce.
Seznam doporučené literatury
Podle pokynů vedoucího práce.
Přílohy volně vložené
-
Přílohy vázané v práci
-
Převzato z knihovny
Ne
Plný text práce
Přílohy
Posudek(y) oponenta
Hodnocení vedoucího
Záznam průběhu obhajoby
Studentka přednesla výsledky své diplomové práce, poté byla seznámena s posudky vedoucího a oponenta diplomové práce. Studentka zodpověděla dotazy oponenta a členů komise.