Diplomová práce se zabývá jaderným histonem H2AX a jeho využitím v oblasti zpětného odhadu absorbované dávky ionizujícího záření (biodozimetrie). V rámci teoretické části jsou vysvětleny biologické účinky interakce ionizujícího záření s živou tkání a aktuálně využívané biodozimetrické přístupy. Experimentální část se zabývá testováním vytipovaných faktorů (dávkový příkon, inkubační podmínky potřebné pro transport krevního materiálu, vliv analyzátoru-průtokového cytometru), které mohou ovlivnit výsledné stanovení H2AX metodou průtokové cytometrie. V rámci diskuze jsou získaná data zhodnocena a jsou navržena řešení pro eliminaci vlivů jednotlivých faktorů.
Anotace v angličtině
The thesis deals with the nuclear histone H2AX and its application in the field of ionizing radiation absorbed dose estimation (biodosimetry). The theoretical part explains the biological effects of the interaction of ionizing radiation with living tissue and the currently used biodosimetric approaches. The experimental part deals with the testing of selected factors (dose rate, incubation conditions required for the transport of blood material, influence of the analyzer-flow cytometer) that can influence the final determination of H2AX by flow cytometry. In the discussion, the data obtained are evaluated and solutions are proposed to eliminate the influence of each factor.
Diplomová práce se zabývá jaderným histonem H2AX a jeho využitím v oblasti zpětného odhadu absorbované dávky ionizujícího záření (biodozimetrie). V rámci teoretické části jsou vysvětleny biologické účinky interakce ionizujícího záření s živou tkání a aktuálně využívané biodozimetrické přístupy. Experimentální část se zabývá testováním vytipovaných faktorů (dávkový příkon, inkubační podmínky potřebné pro transport krevního materiálu, vliv analyzátoru-průtokového cytometru), které mohou ovlivnit výsledné stanovení H2AX metodou průtokové cytometrie. V rámci diskuze jsou získaná data zhodnocena a jsou navržena řešení pro eliminaci vlivů jednotlivých faktorů.
Anotace v angličtině
The thesis deals with the nuclear histone H2AX and its application in the field of ionizing radiation absorbed dose estimation (biodosimetry). The theoretical part explains the biological effects of the interaction of ionizing radiation with living tissue and the currently used biodosimetric approaches. The experimental part deals with the testing of selected factors (dose rate, incubation conditions required for the transport of blood material, influence of the analyzer-flow cytometer) that can influence the final determination of H2AX by flow cytometry. In the discussion, the data obtained are evaluated and solutions are proposed to eliminate the influence of each factor.
Teoretická část:
Teoretická část práce bude zahrnovat literární rešerši z oblasti problematiky jaderného histonu H2AX, jeho významu a funkce v buňce (v organismu) a dále se zejména zaměří na možnosti využití detekce jeho fosforylované formy \recke{gamma}H2AX pro oblast ionizujícího záření a biodozimetrie. Teoretická část poskytne výčet biodozimetrických metodik za účelem možnosti zhodnocení využitelnosti metody detekce \recke{gamma}H2AX v biodozimetrii.
Experimentální část:
V experimentální části budou metodou průtokové cytometrie analyzovány vzorky periferní krve in vitro a dále in vivo (zvířecí model myši) ozářené zdrojem ionizujícího záření gama (60Co). Budou porovnány různé experimentální přístupy, jako je dávkový příkon, skladovací podmínky, aj. a bude vyhodnocen jejich vliv na stanovení \recke{gamma}H2AX za účelem zkvalitnění metodiky detekce \recke{gamma}H2AX pro účely biodozimetrie.
Zásady pro vypracování
Teoretická část:
Teoretická část práce bude zahrnovat literární rešerši z oblasti problematiky jaderného histonu H2AX, jeho významu a funkce v buňce (v organismu) a dále se zejména zaměří na možnosti využití detekce jeho fosforylované formy \recke{gamma}H2AX pro oblast ionizujícího záření a biodozimetrie. Teoretická část poskytne výčet biodozimetrických metodik za účelem možnosti zhodnocení využitelnosti metody detekce \recke{gamma}H2AX v biodozimetrii.
Experimentální část:
V experimentální části budou metodou průtokové cytometrie analyzovány vzorky periferní krve in vitro a dále in vivo (zvířecí model myši) ozářené zdrojem ionizujícího záření gama (60Co). Budou porovnány různé experimentální přístupy, jako je dávkový příkon, skladovací podmínky, aj. a bude vyhodnocen jejich vliv na stanovení \recke{gamma}H2AX za účelem zkvalitnění metodiky detekce \recke{gamma}H2AX pro účely biodozimetrie.
Seznam doporučené literatury
Pejchal J, Österreicher J, Zárybnická L, Šinkorová Z, Tichý A, Vávrová J. Biodozimetrické postupy. Vojenské zdravotnické listy 2010, 79(2):64-71.
Varvara PV, Karaolanis G, Valavanis C, Stanc G, Tzaida O, Trihia H, Patapis P, Dimitroulis D, Perrea D. gamma-H2AX: A potential biomarker in breast cancer. Tumour Biol. 2019 Sep;41(9):1010428319878536.
RODRÍGUEZ-RUIZ ME, VANPOUILLE-BOX C, MELERO I, FORMENTI SC, DEMARIA S. Immunological Mechanisms Responsible for Radiation-Induced Abscopal Effect. Trends Immunology 2018 Aug;39(8):644-655.
Seznam doporučené literatury
Pejchal J, Österreicher J, Zárybnická L, Šinkorová Z, Tichý A, Vávrová J. Biodozimetrické postupy. Vojenské zdravotnické listy 2010, 79(2):64-71.
Varvara PV, Karaolanis G, Valavanis C, Stanc G, Tzaida O, Trihia H, Patapis P, Dimitroulis D, Perrea D. gamma-H2AX: A potential biomarker in breast cancer. Tumour Biol. 2019 Sep;41(9):1010428319878536.
RODRÍGUEZ-RUIZ ME, VANPOUILLE-BOX C, MELERO I, FORMENTI SC, DEMARIA S. Immunological Mechanisms Responsible for Radiation-Induced Abscopal Effect. Trends Immunology 2018 Aug;39(8):644-655.
Přílohy volně vložené
-
Přílohy vázané v práci
-
Převzato z knihovny
Ne
Plný text práce
Přílohy
Posudek(y) oponenta
Hodnocení vedoucího
Záznam průběhu obhajoby
1. Prezentace výsledků diplomové práce.
2. Diskuze k posudkům vedoucího a oponenta diplomové práce.
3. Studentka zodpověděla všechny dotazy a připomínky k diplomové práci.