Acetylcholinesteráza je enzym, jenž hraje důležitou roli v ukončení přenosu nervového vzruchu prostřednictvím hydrolýzy acetylcholinu. Porucha přenosu signálu pomocí tohoto neuromediátoru může být příčinou mnohých onemocnění. Proto je v takovém případě nutno zamezit jeho rozkladu, k čemuž lze využít inhibitory cholinesteráz, vystupující tedy jako léčiva. Inhibitory cholinesteráz se mimo jiné používají i jako pesticidy či dokonce chemické bojové prostředky.
Ve své práci jsem se zaměřila na testování inhibičního účinku vybraných inhibitorů acetylcholinesterázy. Sledováním poklesu aktivity enzymu byla stanovena inhibiční koncentrace, kinetické parametry enzymatické reakce, míra a typ inhibice, a to pomocí spektrofotometrické Ellmanovy metody. Pro inhibitory byly vypočteny hodnoty rovnovážné disociační konstanty, rozdělovací koeficient a polární povrchová plocha molekuly. Kinetické parametry a typ inhibice byly vyhodnoceny pomocí grafického znázornění dle Lineweavera a Burka a dle Dixona.
Anotace v angličtině
Acetylcholinesterase is an enzyme which plays an important role in ending the transmission of nerve impulse by hydrolysis of acetylcholine. Failure of transmission signal with this neuromediator may be the cause of many illnesses. Therefore, in this case it is necessary to prevent its decomposition, for which the cholinesterase inhibitors can be used as drugs. Cholinesterase inhibitors are also used as pesticides or even chemical weapons.
I focused on testing the inhibitory effect of selected acetylcholinesterase inhibitors in this thesis. By monitoring the decrease in enzyme activity the inhibitory concentration, kinetic parameters of the enzymatic reaction, rate and type of inhibition were determined by spectrophotometric Ellman's method. Values of equilibrium dissociation constant, partition coefficient and polar surface area of the molecule were calculated for all of inhibitors. Kinetic parameters and type of inhibition were evaluated using Lineweaver-Burk and Dixon graphical addictions.
Acetylcholinesteráza je enzym, jenž hraje důležitou roli v ukončení přenosu nervového vzruchu prostřednictvím hydrolýzy acetylcholinu. Porucha přenosu signálu pomocí tohoto neuromediátoru může být příčinou mnohých onemocnění. Proto je v takovém případě nutno zamezit jeho rozkladu, k čemuž lze využít inhibitory cholinesteráz, vystupující tedy jako léčiva. Inhibitory cholinesteráz se mimo jiné používají i jako pesticidy či dokonce chemické bojové prostředky.
Ve své práci jsem se zaměřila na testování inhibičního účinku vybraných inhibitorů acetylcholinesterázy. Sledováním poklesu aktivity enzymu byla stanovena inhibiční koncentrace, kinetické parametry enzymatické reakce, míra a typ inhibice, a to pomocí spektrofotometrické Ellmanovy metody. Pro inhibitory byly vypočteny hodnoty rovnovážné disociační konstanty, rozdělovací koeficient a polární povrchová plocha molekuly. Kinetické parametry a typ inhibice byly vyhodnoceny pomocí grafického znázornění dle Lineweavera a Burka a dle Dixona.
Anotace v angličtině
Acetylcholinesterase is an enzyme which plays an important role in ending the transmission of nerve impulse by hydrolysis of acetylcholine. Failure of transmission signal with this neuromediator may be the cause of many illnesses. Therefore, in this case it is necessary to prevent its decomposition, for which the cholinesterase inhibitors can be used as drugs. Cholinesterase inhibitors are also used as pesticides or even chemical weapons.
I focused on testing the inhibitory effect of selected acetylcholinesterase inhibitors in this thesis. By monitoring the decrease in enzyme activity the inhibitory concentration, kinetic parameters of the enzymatic reaction, rate and type of inhibition were determined by spectrophotometric Ellman's method. Values of equilibrium dissociation constant, partition coefficient and polar surface area of the molecule were calculated for all of inhibitors. Kinetic parameters and type of inhibition were evaluated using Lineweaver-Burk and Dixon graphical addictions.
Teoretická část:
1. Vypracovat literární rešerši na téma "cholinesterázy a jejich inhibitory".
2. Popsat strukturu, funkci a mechanismus katalytického působení cholinesteráz a možnosti ovlivnění jejich aktivity na různých úrovních.
3. Shrnout poznatky o Alzheimerově chorobě se zaměřením na nové možnosti léčiv.
Experimentální část:
1. V první části stanovit aktivitu acetylcholinesterázy.
2. Stanovit inhibiční účinnosti vybraných inhibitorů ze skupiny bispyridiniových solí, a to při různých aktivitách enzymu.
3. Stanovit typ inhibice a výsledky porovnat se standardními látkami.
4. Vypočítat kinetické parametry.
5. Stanovit rozdělovací koeficient v systému n-oktanol:voda.
Zásady pro vypracování
Teoretická část:
1. Vypracovat literární rešerši na téma "cholinesterázy a jejich inhibitory".
2. Popsat strukturu, funkci a mechanismus katalytického působení cholinesteráz a možnosti ovlivnění jejich aktivity na různých úrovních.
3. Shrnout poznatky o Alzheimerově chorobě se zaměřením na nové možnosti léčiv.
Experimentální část:
1. V první části stanovit aktivitu acetylcholinesterázy.
2. Stanovit inhibiční účinnosti vybraných inhibitorů ze skupiny bispyridiniových solí, a to při různých aktivitách enzymu.
3. Stanovit typ inhibice a výsledky porovnat se standardními látkami.
4. Vypočítat kinetické parametry.
5. Stanovit rozdělovací koeficient v systému n-oktanol:voda.
Seznam doporučené literatury
Podle pokynů vedoucího diplomové práce.
Seznam doporučené literatury
Podle pokynů vedoucího diplomové práce.
Přílohy volně vložené
-
Přílohy vázané v práci
-
Převzato z knihovny
Ne
Plný text práce
Přílohy
Posudek(y) oponenta
Hodnocení vedoucího
Záznam průběhu obhajoby
Prezentace výsledků diplomové práce.
}
Diskuse k posudku vedoucího a oponenta diplomové práce.
}
Studentka zodpověděla všechny dotazy a připomínky k DP.